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yourandeziwo金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】質(zhì)粒DNA提取后的PCR 已有10人參與
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| 我前幾天做了下大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取情況，然后想做下跑膠回收，但是跑膠之前，我想做下PCR，哪位朋友有這方面的實(shí)驗(yàn)資料或者什么的么？先謝謝了。 |
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shengwufenzi
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scelab(金幣+1):熱心蟲友，歡迎多來交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-27 22:45
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我不知道我理解的是否正確，你是想從質(zhì)粒DNA中擴(kuò)增你的目的基因，然后把擴(kuò)增產(chǎn)物跑膠回收獲得目的基因，是吧？ 如果是這樣，那么你可以初步先采用下面這個(gè)PCR體系：1ul引物1，1ul引物2，2ul質(zhì)粒DNA，2ul dNTP，0.5ul Ex Taq酶，5ul buffer，加入ddH2O補(bǔ)足總體系為50ul。注意加各種試劑的順序：先加體積最大的ddH2O，然后是buffer、引物、DNA和dNTP，最后加酶。記得混勻體系。 上面的體系是較為粗放的，你可以先嘗試一下，然后根據(jù)PCR的結(jié)果再調(diào)整更適宜的體系。 |
7樓2010-04-27 21:59:11
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