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biozhangliang木蟲(chóng) (小有名氣)
土博士
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[交流]
【求助/交流】散金幣，請(qǐng)問(wèn)熒光標(biāo)記酶方面的東，謝謝！ 已有2人參與
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本人要做個(gè)試驗(yàn)，看酶對(duì)植物的作用。 例如，纖維素酶對(duì)甘薯的作用。想得到電鏡照片。 思路是，首先把纖維素酶用熒光標(biāo)記，然后再用這個(gè)酶去作用甘薯，看酶是怎么逐漸作用的，最后在用熒光顯微鏡照片。 我想知道，怎么對(duì)我現(xiàn)在手上的酶做熒光標(biāo)記，是有商品試劑盒還是什么？ 標(biāo)記好的酶，還是像以前一樣，直接用酒可以了嗎？ 標(biāo)記過(guò)的酶性質(zhì)上有沒(méi)有什么變化，是否需要做一定的試驗(yàn)去考察標(biāo)記前后的酶變化，需要做什么試驗(yàn)？ 謝謝�。�！ 有用的答案都會(huì)散金幣的，謝謝！ |
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biozhangliang
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2樓2010-05-07 15:16:41
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lstt09nk(金幣+3):感謝回帖交流~~ 2010-05-07 19:02:02
biozhangliang(金幣+3):謝謝！ 2010-05-10 09:16:08
lstt09nk(金幣+3):感謝回帖交流~~ 2010-05-07 19:02:02
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1、熒光染料與蛋白質(zhì)連接這樣的技術(shù)一般很少看到有實(shí)驗(yàn)室會(huì)做。見(jiàn)的比較多的都是一些商品化的抗體酶。比如連有HRP的二抗，連有fitc的二抗之類(lèi)的。一定要做就查查文獻(xiàn)吧，怎么都覺(jué)得跟化學(xué)合成一樣。 2、不知道你說(shuō)的電鏡是不是電子顯微鏡的簡(jiǎn)稱(chēng)，如果是的話(huà)你要明白電鏡是不能采集熒光信號(hào)的。采集熒光請(qǐng)使用熒光或者共聚焦顯微鏡 3、個(gè)人覺(jué)得你應(yīng)該跟你的導(dǎo)師討論一下實(shí)驗(yàn)的細(xì)節(jié)，個(gè)人覺(jué)得有些地方不太合理。“對(duì)甘薯的影響”這種話(huà)太籠統(tǒng)了，最后有方向比如生理指標(biāo)、生化指標(biāo)、或者顯微結(jié)構(gòu)之類(lèi)的 4、就算你可以用熒光去標(biāo)記酶然后預(yù)期能看到什么呢？目鏡下大片的熒光是你的酶，而你的甘薯并不會(huì)有什么特異的結(jié)構(gòu)發(fā)出熒光，你怎么得出結(jié)論呢？ |
3樓2010-05-07 16:49:51
biozhangliang
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1、熒光染料與蛋白質(zhì)連接這樣的技術(shù)一般很少看到有實(shí)驗(yàn)室會(huì)做。見(jiàn)的比較多的都是一些商品化的抗體酶。比如連有HRP的二抗，連有fitc的二抗之類(lèi)的。一定要做就查查文獻(xiàn)吧，怎么都覺(jué)得跟化學(xué)合成一樣。 這個(gè)我也不知道了 2、不知道你說(shuō)的電鏡是不是電子顯微鏡的簡(jiǎn)稱(chēng)，如果是的話(huà)你要明白電鏡是不能采集熒光信號(hào)的。采集熒光請(qǐng)使用熒光或者共聚焦顯微鏡 是用的熒光顯微鏡 3、個(gè)人覺(jué)得你應(yīng)該跟你的導(dǎo)師討論一下實(shí)驗(yàn)的細(xì)節(jié)，個(gè)人覺(jué)得有些地方不太合理�！皩�(duì)甘薯的影響”這種話(huà)太籠統(tǒng)了，最后有方向比如生理指標(biāo)、生化指標(biāo)、或者顯微結(jié)構(gòu)之類(lèi)的 我主要想想看酶是怎么作用于甘薯細(xì)胞壁的，主要作用于細(xì)胞壁的那一部分（如，果膠，木質(zhì)素等）。也就是您所說(shuō)的顯微結(jié)構(gòu)。 4、就算你可以用熒光去標(biāo)記酶然后預(yù)期能看到什么呢？目鏡下大片的熒光是你的酶，而你的甘薯并不會(huì)有什么特異的結(jié)構(gòu)發(fā)出熒光，你怎么得出結(jié)論呢？ 我現(xiàn)在也不知道甘薯會(huì)不會(huì)自發(fā)熒光，所以想試試。應(yīng)為我看見(jiàn)別人文獻(xiàn)上面，酶和其它底物（如，竹子）接觸部分的圖片很好，我也想看看 |
4樓2010-05-10 09:30:30
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