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biozhangliang木蟲 (小有名氣)
土博士
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[交流]
【求助/交流】散金幣，請問熒光標(biāo)記酶方面的東，謝謝！ 已有2人參與
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本人要做個試驗，看酶對植物的作用。 例如，纖維素酶對甘薯的作用。想得到電鏡照片。 思路是，首先把纖維素酶用熒光標(biāo)記，然后再用這個酶去作用甘薯，看酶是怎么逐漸作用的，最后在用熒光顯微鏡照片。 我想知道，怎么對我現(xiàn)在手上的酶做熒光標(biāo)記，是有商品試劑盒還是什么？ 標(biāo)記好的酶，還是像以前一樣，直接用酒可以了嗎？ 標(biāo)記過的酶性質(zhì)上有沒有什么變化，是否需要做一定的試驗去考察標(biāo)記前后的酶變化，需要做什么試驗？ 謝謝�。。� 有用的答案都會散金幣的，謝謝！ |
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★ ★ ★
lstt09nk(金幣+3):感謝回帖交流~~ 2010-05-07 19:02:02
biozhangliang(金幣+3):謝謝！ 2010-05-10 09:16:08
lstt09nk(金幣+3):感謝回帖交流~~ 2010-05-07 19:02:02
biozhangliang(金幣+3):謝謝！ 2010-05-10 09:16:08
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1、熒光染料與蛋白質(zhì)連接這樣的技術(shù)一般很少看到有實驗室會做。見的比較多的都是一些商品化的抗體酶。比如連有HRP的二抗，連有fitc的二抗之類的。一定要做就查查文獻吧，怎么都覺得跟化學(xué)合成一樣。 2、不知道你說的電鏡是不是電子顯微鏡的簡稱，如果是的話你要明白電鏡是不能采集熒光信號的。采集熒光請使用熒光或者共聚焦顯微鏡 3、個人覺得你應(yīng)該跟你的導(dǎo)師討論一下實驗的細節(jié)，個人覺得有些地方不太合理�！皩Ω适淼挠绊憽边@種話太籠統(tǒng)了，最后有方向比如生理指標(biāo)、生化指標(biāo)、或者顯微結(jié)構(gòu)之類的 4、就算你可以用熒光去標(biāo)記酶然后預(yù)期能看到什么呢？目鏡下大片的熒光是你的酶，而你的甘薯并不會有什么特異的結(jié)構(gòu)發(fā)出熒光，你怎么得出結(jié)論呢？ |
3樓2010-05-07 16:49:51
biozhangliang
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2樓2010-05-07 15:16:41
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1、熒光染料與蛋白質(zhì)連接這樣的技術(shù)一般很少看到有實驗室會做。見的比較多的都是一些商品化的抗體酶。比如連有HRP的二抗，連有fitc的二抗之類的。一定要做就查查文獻吧，怎么都覺得跟化學(xué)合成一樣。 這個我也不知道了 2、不知道你說的電鏡是不是電子顯微鏡的簡稱，如果是的話你要明白電鏡是不能采集熒光信號的。采集熒光請使用熒光或者共聚焦顯微鏡 是用的熒光顯微鏡 3、個人覺得你應(yīng)該跟你的導(dǎo)師討論一下實驗的細節(jié)，個人覺得有些地方不太合理�！皩Ω适淼挠绊憽边@種話太籠統(tǒng)了，最后有方向比如生理指標(biāo)、生化指標(biāo)、或者顯微結(jié)構(gòu)之類的 我主要想想看酶是怎么作用于甘薯細胞壁的，主要作用于細胞壁的那一部分（如，果膠，木質(zhì)素等）。也就是您所說的顯微結(jié)構(gòu)。 4、就算你可以用熒光去標(biāo)記酶然后預(yù)期能看到什么呢？目鏡下大片的熒光是你的酶，而你的甘薯并不會有什么特異的結(jié)構(gòu)發(fā)出熒光，你怎么得出結(jié)論呢？ 我現(xiàn)在也不知道甘薯會不會自發(fā)熒光，所以想試試。應(yīng)為我看見別人文獻上面，酶和其它底物（如，竹子）接觸部分的圖片很好，我也想看看 |
4樓2010-05-10 09:30:30
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