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pptony113銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】誰能解釋下酵母雙雜交的基本原理? 已有1人參與
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| 如題 簡單明了的介紹下 謝謝誒 |
木蟲 (正式寫手)
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酵母雙雜交由Fields et al [1]在1989 年提出. 他的產(chǎn)生是基于對真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子特別是酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4性質(zhì)的研究. GAL4包括兩個彼此分離的但功能必需的結(jié)構(gòu)域. 位于N 端1-174 位氨基酸殘基區(qū)段的DNA 結(jié)合域(DNA binding domain,DNA-BD)和位于C 端768-881 位氨基酸殘基區(qū)段的轉(zhuǎn)錄激活域(Activation domain,AD).DNA-BD 能夠識別位于GAL4 效應(yīng)基因(GAL4-responsive gene)的上游激活序列(Upstream activating sequence,UAS),并與之結(jié)合. 而AD 則是通過與轉(zhuǎn)錄機(jī)構(gòu)(transcription machinery)中的其他成分之間的結(jié)合作用,以啟動UAS下游的基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄. DNA-BD和AD單獨分別作用并不能激活轉(zhuǎn)錄反應(yīng),但是當(dāng)二者在空間上充分接近時,則呈現(xiàn)完整的GAL4轉(zhuǎn)錄因子活性并可激活UAS下游啟動子,使啟動子下游基因得到轉(zhuǎn)錄. |
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