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xw2129金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】PI法 細胞周期 細胞凋亡 已有10人參與
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| 請教:PI法能不能同時測細胞周期和細胞凋亡?哪位高手做過,請指教一下! |
分子生化實驗經(jīng)驗積累 |
銅蟲 (正式寫手)
榮譽版主 (文壇精英)
自由人,我型我秀!
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PI染色,流式細胞儀可以查看細胞被阻斷在什么時期?梢园 內(nèi)容來源 http://www.keygentec.com.cn/list ... _q=0&t_id_q=170 熒光標記是研究細胞凋亡的最基本方法。細胞凋亡的形態(tài)學變化及生化學變化都可以通過熒光標記的的方法而檢測出來,從而區(qū)別鑒別出正常細胞、凋亡細胞、壞死細胞以及不同凋亡時期或細胞周期。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種DNA結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長分別為536nm和617nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無膜通透性,不能透過活細胞膜,只能染死細胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細胞不能著色,早期凋亡細胞呈微弱紅光,晚期凋亡細胞紅光加強,壞死細胞呈強紅色熒光。采用流式細胞儀檢測細胞周期時,凋亡細胞因內(nèi)源性核酸酶被激活,使DNA廣泛降解、斷裂,DNA結(jié)構(gòu)發(fā)生劇變,隨著凋亡的進程,DNA斷裂產(chǎn)生的小分子量DNA溢出胞外,細胞總DNA量降低,于正常G0/G1細胞群前出現(xiàn)一DNA低染細胞群,即G1峰前出現(xiàn)亞二倍體峰(sub-G1)或稱A0細胞群,即凋亡細胞群。用本試劑盒的PI直接對細胞DNA染色后,進行流式細胞儀分析,即可檢測到凋亡細胞DNA的變化。 |

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