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lanlan_zhu木蟲 (著名寫手)
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求助翻譯【糖化酶】英文文獻一篇
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一篇糖化酶的英文文獻，急需，希望給位幫幫忙。 文獻在郵箱里：guojiazainali@163.com 密碼：123456789 |
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2樓2010-05-29 20:21:53
lanlan_zhu
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3樓2010-05-30 12:10:23
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4樓2010-05-30 15:31:26
lanlan_zhu(金幣+20, 翻譯EPI+1):非常感謝，不過我今天晚上必須上交，等不了太長時間了。 2010-05-31 09:21:06
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利用糖化酶：綠色熒光蛋白融合蛋白來檢測蛋白質(zhì)在黑曲霉中的分泌 在黑曲霉中，通過構(gòu)建糖化酶：綠色熒光蛋白融合蛋白以利用熒光蛋白作為蛋白質(zhì)分泌的報告蛋白質(zhì)。設(shè)計了兩種含有不同長度糖化酶的分泌融合蛋白質(zhì)。分泌表達融合蛋白質(zhì)發(fā)現(xiàn)熒光位于菌絲的細胞壁和菌絲的隔壁中，熒光濃度最高處位于菌絲生長點。通過Western雜交試驗僅在培養(yǎng)不久的soya milk medium的上清中發(fā)現(xiàn)融合蛋白質(zhì)。在培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基的酸化和蛋白酶的產(chǎn)生可能是胞外和胞壁熒光濃度降低和不能檢測到融合蛋白質(zhì)的原因。一株帶有融合蛋白質(zhì)基因的菌株用UV突變，并篩選分泌通道蛋白質(zhì)的突變體。篩選到三種不能在淀粉或明膠培養(yǎng)基產(chǎn)生光環(huán)（淀粉被消化后會產(chǎn)生環(huán)中區(qū)域）突變體。這三株突變體與母菌株相比生長較差。熒光顯示，在其中的兩柱中，融合蛋白質(zhì)聚集在體內(nèi)。第三株的熒光在細胞壁中，并沒有在胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)蛋白的聚集。這些表明構(gòu)建的融合蛋白能方便的作為熒光標簽來研究蛋白質(zhì)分泌的動態(tài)過程并可作為分離分泌通道蛋白質(zhì)突變體的有效方法。 摘要，如果你還需要，那我只能以后慢慢翻譯了。感覺不是很難啊。但我太忙，時間可能比較久的 |
5樓2010-05-31 08:52:41
lanlan_zhu
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6樓2010-05-31 09:19:25
7樓2010-05-31 11:01:06
lanlan_zhu
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8樓2010-05-31 11:38:17
9樓2010-05-31 11:42:01
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絲狀真菌具有較強的分泌胞外酶的能力。曾報道在優(yōu)化的培養(yǎng)條件下，曲霉屬和木酶屬的一些成員能分別產(chǎn)生20g/L的葡糖糖化酶和40g/L的纖維素酶（(Finkelstein, 1987; Durand et al., 1988)）。另外，由于很多工業(yè)開發(fā)的菌株是一般被認為是安全的（GRAS），因此很多被用做生產(chǎn)外源蛋白質(zhì)的宿主。但是很多情況下，外源蛋白質(zhì)的產(chǎn)量很難超過幾毫克每升(Gouka et al., 1997a)。盡管蛋白質(zhì)分分泌量較低，但在一些情況下，高的mRNA量表明瓶頸可能存在于轉(zhuǎn)錄后水平，可能就存在于蛋白質(zhì)的分泌途徑(Jeenes et al., 1994;NyyssoÖnen & KeraÖnen, 1995; Gouka et al., 1996)。借用基因融合策略，把一個感興趣的外源基因接到同源的分泌量高的蛋白質(zhì)，雖然融合蛋白質(zhì)的分泌量仍比同源蛋白質(zhì)的分泌量的低很多，但這一策略能緩解蛋白質(zhì)翻譯后在轉(zhuǎn)運途徑中的限制。(Ward et al., 1990;Contreras et al., 1991; Broekhuijsen et al., 1993; Archeret al., 1994; Gouka et al., 1997b)。 在絲狀真菌中，蛋白質(zhì)分分泌被認為發(fā)生在菌絲體的生長點，在這蛋白質(zhì)通過新合成的細胞壁而繞過了蛋白質(zhì)在整個細胞中的大量流動（我理解的是避免充滿整個細胞，你自己在斟酌一下吧）（(Wessels, 1994)）. WÖsten (1991)等人間接的證明蛋白質(zhì)的分泌時與菌絲體的生長是相偶聯(lián)的，雖然黑曲霉的糖化酶位于靠近頂點處，但是糖化酶好像主要在菌絲頂點被分泌(A. Keizer-Gunnink, personal communication)。黃孢原毛平革菌的木質(zhì)素過氧化酶也被報道過油類似的結(jié)果(Moukha et al., 1993)。 來自維多利亞水母的綠色熒光蛋白質(zhì)已經(jīng)在多種生物被用作檢測基因表達和蛋白質(zhì)定位的標簽(Chalfie, 1995)。熒光蛋白的紅移變異體已經(jīng)被開發(fā)出來，其中最大的激發(fā)波長被移至490nm，與野生型相比，這產(chǎn)生了更鮮艷的熒光(Heim et al., 1995)。其中一個變異體的合成版本（S65T，sGFP）已經(jīng)在植物中應(yīng)用(Chiu et al., 1996; Haas et al., 1996)，并在多種真菌中得到成功表達，其中包括白念珠菌，構(gòu)巢曲霉，出芽短梗霉和玉蜀黍黑粉菌(Spellig et al., 1996; Cormack et al., 1997; Suelmann et al., 1997; van den Wymelenberg et al., 1997; Fernandez-Abalos et al., 1998; Siedenberg et al., 1999)。 在本文研究中，我們描述在黑曲霉中表達融合蛋白質(zhì)糖化酶（GLA）：：熒光蛋白質(zhì)（sGFP）,并以此作為生長菌絲中蛋白質(zhì)分泌的報告蛋白質(zhì)。結(jié)果充分證明了此融合蛋白質(zhì)可作為蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運的報告蛋白質(zhì)和可作為篩選蛋白質(zhì)分泌通道蛋白質(zhì)突變體的工具。 下午吃完飯回來給你方法部分 |
10樓2010-05-31 15:03:24
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