| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1611 | 回復(fù): 7 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖,點(diǎn)擊這里查看本話(huà)題的所有回帖 | |||
dhmdddd木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
|
[交流]
【求助/交流】電轉(zhuǎn)化效率 已有3人參與
|
||
| 電轉(zhuǎn)化大腸桿菌,轉(zhuǎn)化的是DNA片段,電轉(zhuǎn)杯是0.1的,條件是1500V,5ms,轉(zhuǎn)了好多次都是失敗,感受態(tài)制備時(shí)用10%的甘油1ml洗3次,轉(zhuǎn)化時(shí)是先加5微升片段冰上放置5min,再加5微升再放5min,如何可以提高電轉(zhuǎn)化的效率?先在這邊謝過(guò)了! |

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

金蟲(chóng) (小有名氣)
| 我們實(shí)驗(yàn)室也是用的電轉(zhuǎn)化,電壓比你高1800V,一般我們是批量制感受態(tài),放-80,轉(zhuǎn)化時(shí)先冰上放置2-3min,質(zhì)粒一般加1ul,連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)2ul,復(fù)蘇1h,質(zhì)粒一般涂1ul,連接產(chǎn)物看情況。我不知道你這里的DNA片段是沒(méi)有環(huán)化的片段還是連接產(chǎn)物。你轉(zhuǎn)化率低低到什么程度? |

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
|
拿已知濃度的質(zhì)粒先測(cè)一下感受態(tài)的效果怎么樣。如果好的話(huà)再轉(zhuǎn)連接產(chǎn)物,如果沒(méi)菌斑就是連接的問(wèn)題了。 另外你3次都用1ml洗嗎?洗不干凈吧,前兩次體積可以大一點(diǎn),反正要離心的。 你居然加了10ul的連接產(chǎn)物,也不怕爆,我最多加4ul。加多了很容易爆的,一旦爆了肯定長(zhǎng)不出斑來(lái)。 |
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 環(huán)境學(xué)碩288求調(diào)劑 +7 | 皮皮皮123456 2026-03-22 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 考研化學(xué)308分求調(diào)劑 +7 | 你好明天你好 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
[考研] 生物學(xué)一志愿985,分?jǐn)?shù)349求調(diào)劑 +6 | zxts12 2026-03-21 | 9/450 |
|
|
[考研] 336化工調(diào)劑 +4 | 王大坦1 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 324 +3 | Promise-jyl 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +3 | 濤濤Wjt 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 冬十三 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | 來(lái)好運(yùn)來(lái)來(lái)來(lái) 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)071000,求調(diào)劑 +4 | 沿岸有貝殼6 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | 鳳凰院丁真 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +3 | Jack?k?y 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
[考研] 初始318分求調(diào)劑(有工作經(jīng)驗(yàn)) +3 | 1911236844 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
[考研] 材料 336 求調(diào)劑 +3 | An@. 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +4 | 一志愿京區(qū)211 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué),327分,材料與化工085600 +9 | Ncdx123456 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
[考研] 考研調(diào)劑求學(xué)校推薦 +3 | 伯樂(lè)29 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +9 | 想上學(xué)吖吖 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | eation27 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
[考研] 0856調(diào)劑,是學(xué)校就去 +8 | sllhht 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
[考研] 收復(fù)試調(diào)劑生 +4 | 雨后秋荷 2026-03-18 | 4/200 |
|