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xjx11228木蟲 (正式寫手)
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[交流]
如何求酶促反應(yīng)中最大反應(yīng)速度?單位是什么?
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問題:對于一個酶促反應(yīng),通常由米氏方程求米氏常數(shù)和最大反應(yīng)速度以及催化反轉(zhuǎn)常數(shù),可是有關(guān)數(shù)據(jù)只是底物一系列濃度及所對應(yīng)的吸光度值,請問如何求出米氏常數(shù)?尤其是這個最大反應(yīng)速度的單位不好確定? 我是不是還缺少條件?文獻(xiàn)都是10^-8 M s^-1,這個如何得出?謝謝各位了。 [ Last edited by xjx11228 on 2010-6-9 at 16:34 ] |
蛋白質(zhì)純化技術(shù) |

金蟲 (正式寫手)
| 你的吸光度值【A】不能直接用作求算最大反應(yīng)速度的參數(shù),而是應(yīng)該轉(zhuǎn)換成產(chǎn)物濃度【Y】mol/L(這一步用標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以得出),通過短時間t內(nèi)的產(chǎn)物濃度的變化求出初反應(yīng)速度r0,(mol/L.s)。假設(shè)你的底物濃度為【S】,則將底物濃度的倒數(shù)1/[S]作為橫坐標(biāo),將反應(yīng)初速度的倒數(shù)1/r0作為縱坐標(biāo)作圖,做出來的圖上面就有最大反應(yīng)速度和米氏常數(shù)這類的參數(shù)了,單位就是mol/(L.s) |

木蟲 (正式寫手)
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非常謝謝你的回答。方法是對的?墒怯幸稽c(diǎn)還不明白。由A轉(zhuǎn)換為濃度時由標(biāo)準(zhǔn)曲線來計算產(chǎn)物濃度。關(guān)鍵是這個產(chǎn)物濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線如何制得?還是用同一組數(shù)據(jù)? 如HRP對TMB底物的米氏常數(shù)和最大反應(yīng)速度: TMB濃度 Absorbance 1 0.034 2 ..... 3 ..... 4 5 6 產(chǎn)物的濃度如何得到?測得A是底物氧化后產(chǎn)物的,是否由化學(xué)反應(yīng)方程式得出。這樣一來吸光度數(shù)值就沒有用了。 是否有其它轉(zhuǎn)換方法呢?用吸光度肯定不對,否則計算單位不對。 |
木蟲 (正式寫手)
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