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jidian91

銀蟲 (小有名氣)

[交流] 【求助】滅蠅胺的分析方法 已有3人參與

有沒有人知道滅蠅胺的檢測方法?最好是氣相或者是液相-紫外的

本人已經(jīng)試過液相紫外
                    
                     使用waters 的C18柱 甲醇水    乙腈水的各個(gè)比例  都不理想

                            waters的 NH2柱  乙腈水  也試過了  不是很理想 重復(fù)性極差



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mooncakexzj

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jidian91(金幣+1):謝謝參與
bingliany:傳上來吧,傳上來給你加BB~ 2010-06-12 20:35:09
jidian91(金幣+5):謝謝 2010-06-14 11:51:39
引用回帖:
Originally posted by jidian91 at 2010-06-12 15:17:23:
有沒有人知道滅蠅胺的檢測方法?最好是氣相或者是液相-紫外的

本人已經(jīng)試過液相紫外
                    
                     使用waters 的C18柱 甲醇水    乙腈水的各個(gè)比例  都不理想

             ...

JAP-108  滅蠅胺檢測方法(農(nóng)產(chǎn)品)

滅蠅胺檢測方法(畜產(chǎn)品)
這兩個(gè)我有,你要不要,要的話給你傳上來!
海上生明月,天涯共此時(shí)!
2樓2010-06-12 18:41:11
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mooncakexzj

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bingliany(金幣+1):辛苦了~ 2010-06-12 20:52:47
給你傳上來了,有用的話說一聲!
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海上生明月,天涯共此時(shí)!
3樓2010-06-12 20:42:38
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西湖醉魚

版主 (知名作家)

皇家神龍教-魚族族長

★ ★
jidian91(金幣+1):謝謝參與
bingliany(金幣+1):謝謝應(yīng)助,歡迎常來精化版~ 2010-06-20 09:43:24
高效液相色譜法測定含脂羊毛中滅蠅胺和環(huán)蟲腈
【摘要】  建立了高效液相色譜法(HPLC)測定含脂羊毛中的滅蠅胺和環(huán)蟲腈的方法及HPLC-MS/MS確證方法。樣品用80 mL 1%三氯乙酸溶液超聲提取,MCX柱凈化,Hypersil NH2色譜柱分離,水-乙腈為流動(dòng)相梯度洗脫,214 nm檢測,HPLC-MS/MS確證。在正離子電噴霧電離(ESI+)模式下,環(huán)蟲腈[M+H]+及2個(gè)主要的特征離子分別為m/z 191.0,150.0和163.0;滅蠅胺[M+H]+及2個(gè)主要的特征離子分別為m/z 167.0,85.0和125.0。在0.05~5.0 mg/L范圍內(nèi),滅蠅胺和環(huán)蟲腈均有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)均為0.9999。本方法的檢出限滅蠅胺為0.02 mg/kg,環(huán)蟲腈為0.01 mg/kg。方法的平均加標(biāo)回收率: 滅蠅胺為95.0%~99.9%,環(huán)蟲腈為83.6%~92.2%。

【關(guān)鍵詞】  滅蠅胺;環(huán)蟲腈;含脂羊毛;殘留分析;高效液相色譜法;高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜

           Determination of Cyromazine and Dicyclanil Residues on Greasy Wool by High Performance Liquid Chromatography FAN Yuan-Mu,YU Xue-Jun,GU Xiao-Jun,YIN Ju-Yi,QIU Ya-Jun,CHEN Shu-Bing,CHEN Jie,ZHAN Jia,HE Xiao-Yu,CHEN Jun,HUANG Shao-Tang*(Ningbo Entry-Exit Inspection and Quarantine Buereau of People’s Republic of China,Ningbo 315012)Abstract  A method for the determination of cyromazine and dicyclanil residues on greasy wool was developed with HPLC and confirmed with HPLC-MS/MS.The cyromazine and dicyclanil residues on greasy wool were extracted with 1% trichloroacetic acid solution with ultrasonic,and cleaned up by MCX SPE column.The HPLC separation was performed on a Hypersil NH2 using water-acetonitrile(V/V) as the mobile phase with gradient elution and detected at the wavelength of 214 nm.The corroboration method of HPLC-MS/MS was used with electro-spray ionization of positive ion mode.The [M+H]+ and characteristic ions of dicyclanil were m/z 191.0,150.0 and 163.0,and cyromazine were m/z 167.0,85.0 and 125.0.The linear ranges of cyromazine and dicyclanil were 0.05-5.0 mg/L.There were good linear relationships between the peak area and concentration in the linear range.The correlation coefficient was 0.9999.The detection limit of cyromazine was 0.02 mg/kg,and dicyclanil was 0.01 mg/kg.The average recoveries of cyromazine and the dicyclanil were 95.0%-99.9% and 83.6%-92.2%,respectively.

  Keywords  Cyromazine;Dicyclanil;Greasy wool;Pesticide residue;High performance liquid chromatography;High performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry

  1  引言

  滅蠅胺,又名環(huán)丙氨嗪,是三嗪類昆蟲生長調(diào)節(jié)劑,可抑制雙翅目及部分鞘翅目昆蟲幼蟲的生長發(fā)育和羽化,被廣泛添加到動(dòng)物飼料中,用于控制動(dòng)物廄舍內(nèi)蠅蛆的生長發(fā)育。其在動(dòng)物體內(nèi)的代謝物三聚氰胺,能導(dǎo)致小鼠膀胱腫瘤,美國和歐盟各國均制定了嚴(yán)格的飼料添加濃度和畜產(chǎn)品中的最高殘留限量為0.05 mg/kg。 環(huán)蟲腈,又名地昔尼爾,是干擾昆蟲表皮形成的昆蟲生長調(diào)節(jié)劑,具有很強(qiáng)的附著力,對(duì)體外寄生蟲具有良好的持效性,能有效防治棉花、玉米等作物的綠盲蝽象、煙芽夜蛾、棉鈴象等害蟲,并有效防治家蠅和埃及伊蚊。1992年國際羊毛局為關(guān)注生態(tài)環(huán)境,開始對(duì)含脂羊毛進(jìn)行藥物殘留檢測[1], 1994年在羊毛中檢出滅蠅胺,1999年檢出環(huán)蟲腈。歐盟有關(guān)紡織品生態(tài)標(biāo)簽(Eco-labe1)標(biāo)準(zhǔn)的指令(2002/37I/EC)和國際紡織品生態(tài)學(xué)研究與檢測協(xié)會(huì)的生態(tài)紡織品標(biāo)準(zhǔn)100(Oeko-Tex standard 100)都對(duì)殺蟲劑在羊毛或紡織品中的殘留提出了限量要求。2007年修訂的Eco-labe1標(biāo)準(zhǔn)[2]規(guī)定,昆蟲生長調(diào)節(jié)劑在含脂羊毛及其它含角蛋白纖維中的殘留不得超過2 mg/kg。

  目前,有關(guān)滅蠅胺和環(huán)蟲腈殘留量檢測方法較少[3~8],主要有蔬菜和土壤中滅蠅胺及其代謝物三聚氰胺的檢測,檢測方法主要有HPLC,HPLC-MS/MS和GC-MS,而含脂羊毛中滅蠅胺、環(huán)蟲腈殘留量檢測方法未見報(bào)道。滅蠅胺、環(huán)蟲腈與三聚氰胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)相似,本研究參考文獻(xiàn)[3~12],建立了三氯乙酸溶液提取,MCX柱富集與凈化,高效液相色譜(HPLC)檢測的方法。

  2  實(shí)驗(yàn)部分

  2.1  儀器與試劑

  Agilent1100 HPLC(美國Agilent公司); API 3000 MS/MS串聯(lián)質(zhì)譜檢測器(加拿大ABI 公司); SIGMA-3K臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(Sigma公司); QL-901旋渦混合器(其林貝爾儀器制造公司); 固相萃取儀(Supelco公司); N-EVAPTM氮吹儀; 超聲波清洗儀(50 Hz); Oasis MCX SPE柱(美國Waters公司)。

  滅蠅胺(Cyromazine)和環(huán)蟲腈(Dicyclanil),購自Dr.Ehrenstorfer,純度99.0%; 乙腈和甲醇(HPLC級(jí), Tedia公司),氨水和三氯乙酸(分析純);  水為超純水。

  含脂羊毛樣品(利華羊毛工業(yè)有限公司,編號(hào)060427,070126,071031,070716,071012),-20 ℃保存。

  2.2  試樣前處理

  稱取2 g試樣于250 mL錐形瓶中,加入80 mL 1% 三氯乙酸溶液,振蕩,使溶液充分潤濕羊毛后超聲提取30 min,過濾,取40 mL濾液過SPE柱凈化。

  分別用6 mL甲醇、6 mL水預(yù)淋洗MCX柱,然后上試樣,用6 mL 0.01 mol/L HCl溶液洗滌MCX柱,再用6 mL水和6 mL甲醇洗滌MCX柱,抽干后用10%氨水-甲醇溶液6 mL洗脫并接收,洗脫液于40 ℃水浴中以氮?dú)獯蹈,最后? mL乙腈溶解并定容,過0.45 μm濾膜后備用。
   
  2.3  色譜質(zhì)譜條件

  Hypersil NH2色譜柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm);柱溫:30 ℃;流速:1.0 mL/min;檢測波長:214 nm;進(jìn)樣量:20 μL。流動(dòng)相:水(A)-乙腈(B),梯度洗脫: 0~5.5 min, 97% B;5.5~6 min,97%→90% B;6~20 min,90% B;20~21 min,90%→97% B。

  MS/MS條件:正離子電噴霧電離(ESI+);離子源霧化溫度:500 ℃;碰撞氣、氣簾氣和霧化氣均為Ν2,流量分別為8,6和14 mL/min; 聚焦電壓:82 V;吸入電壓:10 V;碰撞電荷吸入電壓:13 V;以多反應(yīng)監(jiān)測模式測定;其它條件見表1。

  表1  滅蠅胺和環(huán)蟲腈的LC-MS/MS測定條件(略)

  Table 1  Determination conditions of cyromazine and dicyclanil

  *:定量離子對(duì)(Quantitative ions)。

  3  結(jié)果與討論

  3.1  提取凈化條件的選擇

  由于滅蠅胺和環(huán)蟲腈均為極性物質(zhì),微溶于水,可溶于熱水、乙醇,其結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì)與三聚氰胺非常接近。常見的三聚氰胺提取液有:磷酸鹽緩沖溶液(pH 2)、稀HCl、20%二乙胺、20%氨水-乙腈溶液、甲醇等。本研究比較了甲醇、乙腈、水和1%三氯乙酸水溶液等不同溶劑的提取效果,最終選定以1%三氯乙酸為提取劑。比較了不同時(shí)間的提取效率,最終確定超聲提取30 min。滅蠅胺和環(huán)蟲腈均為弱堿性化合物,比較了ENVITM-Florisil小柱、Waters Oasis HLB小柱及Waters Oasis MCX小柱凈化效果,實(shí)驗(yàn)表明,在Waters Oasis MCX固相萃取小柱上凈化效果最好。在酸性條件下上樣,使待測物保持正離子態(tài)而被吸附在固相萃取柱上,依次用6 mL 0.01 mol/L HCl溶液、 6 mL水和6 mL甲醇洗滌MCX柱,再用6 mL 10%氨水-甲醇溶液洗脫,能有效去除基質(zhì)干擾,可獲得較高的回收率和較好的重現(xiàn)性。

  3.2  色譜條件的選擇

  圖1  滅蠅胺、環(huán)蟲腈標(biāo)準(zhǔn)溶液(a)、空白羊毛樣品(b)及加標(biāo)羊毛樣品(c)色譜圖(略)

  Fig.1  Chromatogram of standard solution(a), greasy wool blank sample(b) and greasy wool sample added standard solution(c)

  1,1’.環(huán)蟲腈(Dicyclanil); 2,2’.滅蠅胺(Cyromazine)。

  在190~400 nm波長范圍內(nèi)對(duì)滅蠅胺、環(huán)蟲腈混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行波長掃描,發(fā)現(xiàn)兩種物質(zhì)均在214 nm處有較好吸收。本方法以214 nm為檢測波長。因滅蠅胺和環(huán)蟲腈均為極性物質(zhì),在普通的C18柱上保留值很低,很難進(jìn)行分析。滅蠅胺和環(huán)蟲腈極易與C18柱上殘余的硅醇基形成氫鍵,使得峰形拖尾,因此需要在流動(dòng)相中加入離子對(duì)試劑或加酸可以增加C18柱對(duì)滅蠅胺和環(huán)蟲腈的保留并改善峰形。本研究參考文獻(xiàn)[3~12], 對(duì)不同的C18柱和NH2柱進(jìn)行了比較,發(fā)現(xiàn)NH2柱分離效果優(yōu)于C18柱,具體條件見2.3節(jié)。對(duì)雜質(zhì)和目標(biāo)峰能完全分離,并且能使標(biāo)準(zhǔn)峰的響應(yīng)較高,說明本方法對(duì)滅蠅胺和環(huán)蟲腈殘留的測定是可行的。滅蠅胺和環(huán)蟲腈的標(biāo)樣溶液、空白羊毛試樣及羊毛試樣加標(biāo)色譜圖見圖1。

  3.3  線性關(guān)系及檢出限

  用乙腈配制滅蠅胺-環(huán)蟲腈(濃度比2∶1)混合標(biāo)樣貯備溶液(以滅蠅胺濃度計(jì),以下同),并用乙腈依次稀釋至0.05,0.1,0.5,1.0和5.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線溶液,在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,滅蠅胺線性方程是y=216.95x-2.93,相關(guān)系數(shù)r=0.99999;環(huán)蟲腈線性方程為y=175.32x-1.19,相關(guān)系數(shù)r=0.99986,由此可見二者均有很好的線性關(guān)系。根據(jù)S/N≥10,本方法對(duì)滅蠅胺的檢出限為0.02 mg/kg,對(duì)環(huán)蟲腈的檢出限為0.01 mg/kg。在 0.05~5.0 mg/L范圍內(nèi)能夠滿足定量分析二者殘留的要求。

  表2  羊毛樣品加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)

  Table 2  Spiked recoveries of cyromazine and dicyclanil on greasy wool sample

  3.4  精密度和回收率實(shí)驗(yàn)

  在相同的實(shí)驗(yàn)條件下,分別測定添加0.2, 1.0和2.0 mg/kg滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)品,0.1, 0.5和1.0 mg/kg環(huán)蟲腈標(biāo)準(zhǔn)的含脂羊毛樣品各3次,平均回收率檢測結(jié)果見表2。按照2.2節(jié)中滅蠅胺、環(huán)蟲腈提取方法,對(duì)羊毛進(jìn)行3種濃度的添加回收率和精密度實(shí)驗(yàn),其平均添加回收率: 滅蠅胺在95.0%~99.9%之間,環(huán)蟲腈在83.6%~92.2%之間; 滅蠅胺的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為7.1%~17.6%,環(huán)蟲腈的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為6.1%~17.3%。說明本方法對(duì)羊毛中滅蠅胺和環(huán)蟲腈的檢測重現(xiàn)性好,準(zhǔn)確度較高。

  3.5  HPLC-MS/MS確證

  由于HPLC-MS/MS的死體積小于HPLC,因此在相同的色譜條件下,環(huán)蟲腈和滅蠅胺的保留時(shí)間較HPLC小。對(duì)環(huán)蟲腈和滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)溶液在正離子模式下進(jìn)行全掃描,分別找出環(huán)蟲腈和滅蠅胺準(zhǔn)分子離子[M+H]+ m/z 191.0和167.0,以分子離子峰為母離子對(duì)離子源參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。在優(yōu)化的色譜及質(zhì)譜條件下,再對(duì)環(huán)蟲腈和滅蠅胺的子離子進(jìn)行全掃描,環(huán)蟲腈準(zhǔn)分子離子在碰撞池內(nèi)碰撞產(chǎn)生8個(gè)碎片離子m/z 175.0, 150.0, 163.0, 109.0, 92.0, 83.1, 67.0和41.0,其中m/z 150.0和163.0離子響應(yīng)高,干擾少,因此將m/z 150.0和163.0作為環(huán)蟲腈的定性依據(jù)。滅蠅胺的[M+H]+離子在碰撞池內(nèi)碰撞產(chǎn)生6個(gè)碎片離子m/z 125.0, 108.0, 85.0, 83.1, 68.0和60.0,其中m/z 125.0和85.0響應(yīng)高,干擾少,因此將它們作為滅蠅胺的定性依據(jù)。圖2為環(huán)蟲腈和滅蠅胺的總離子流圖。
  
  圖2  環(huán)蟲腈和滅蠅胺的總離子流圖(1.0 μg/L)(略)

  Fig.2  Total ion chromatogram of dicyclanil and cyromazine

  1.環(huán)蟲腈(Dicyclanil);2.滅蠅胺(Cyromazine).

  3.6  樣品測定

  應(yīng)用建立的方法測定含脂羊毛樣品中的滅蠅胺、環(huán)蟲腈的含量,根據(jù)化合物的色譜峰保留時(shí)間定性,峰面積定量,根據(jù)化合物的質(zhì)譜離子豐度比進(jìn)行確證,檢測結(jié)果見表3,羊毛樣品色譜圖見圖3。
  
  圖3  羊毛樣品色譜圖(略)

  Fig.3  Chromatogram of greasy wool sample

  1. 環(huán)蟲腈(Dicyclanil);  2. 滅蠅胺(Cyromazine)。

  表3  含脂羊毛樣品實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)

  Table 3  Results of cyromazine and dicyclanil in greasy wool sample

【參考文獻(xiàn)】
  1 Nunn C R,Russell I M,Williams S.Residues of Pesticides in Australian Wool 2004-2005: Results from AWI Survey.http://www.awta.com.au/Documents ... TO2005_11_RWG03.pdf[2007-04-03]

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4樓2010-06-19 09:54:13
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820568406

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滅蠅胺檢測方法(畜產(chǎn)品)

http://www.fsr.org.cn/method_file/law/BA1C1AC.PDF
5樓2010-06-19 18:39:15
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紫色的結(jié)局

銅蟲 (小有名氣)


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用乙腈和水,230mv,0.8 -NH2能分開
6樓2011-12-18 15:43:10
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