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luoqinfly銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助】請(qǐng)教紫外吸收波長(zhǎng)的問題 已有7人參與
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| 最近在做雷帕霉素的紫外吸收時(shí)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)濃度為1mg/ml時(shí)其最大吸收波長(zhǎng)與文獻(xiàn)相差較大，吸收波形異常；當(dāng)降低濃度后又回復(fù)正常，我想請(qǐng)問一下這是為什么呢？是一個(gè)什么原理導(dǎo)致的？請(qǐng)各位大俠不吝賜教！ |
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inan
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2樓2010-06-16 08:07:32
sunxiaoli
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3樓2010-06-16 08:56:46
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4樓2010-06-16 10:21:31
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luoqinfly(金幣+5): 2010-06-16 21:09:29
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當(dāng)濃度為1mg/ml時(shí)做紫外光譜的濃度就太大了，在這個(gè)濃度做出來(lái)的紫外光譜是不可靠的。 出現(xiàn)這種情況是正常的。首先你一定明白紫外光譜產(chǎn)生的原理。是由于化合物的電子吸收了紫外光的能量發(fā)生了電子躍遷引起。那么，紫外光譜儀器是根據(jù)它的工作原理來(lái)設(shè)計(jì)的，儀器的一般是光學(xué)零位平衡法或電學(xué)零位平衡法，其原理在這里一兩句說不完。 測(cè)定時(shí)候，樣品的濃度大，吸收就強(qiáng)。但是有一點(diǎn)，儀器的光源能量是有限的，不可能無(wú)限制的把樣品的濃度加下去。當(dāng)樣品的濃度大到一定程度，超過了它的極限，就像幾乎所有光都被樣品吸收了的時(shí)候，就出現(xiàn)你上面說的情況了。在這種情況下，好比你使用玻璃片擋住了紫外光，吸收波形就異常，或出現(xiàn)不規(guī)則的亂線條。 |
8樓2010-06-16 19:49:01
1143382710
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9樓2016-03-15 14:30:28
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