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luomuwuhen金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[交流]
【求助】C18色譜柱壓力大 已有9人參與
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用的時(shí)間比較久了的才c18柱子,最近用著壓力比較大,沖甲醇都能到2000psi,新柱子在900psi左右,反方向沖的話壓力就相對(duì)比較正常,高人指點(diǎn)下原因。之前處理過(guò)幾次,用10%的甲醇反向1.0ml流速?zèng)_2h,然后正向用壓力就正常了,之后再用幾次壓力又上去了,也用異丙醇反沖過(guò)柱子。個(gè)人認(rèn)為柱子里應(yīng)該沒(méi)有緩沖鹽析出和強(qiáng)保留成分的情況,難道是有臟東西進(jìn)柱子?那又為什么壓力沖下來(lái)再用兩次又上去了呢?無(wú)奈中…… 柱子用了接近8個(gè)月,基本每天都用,每天使用時(shí)間在5小時(shí)左右。柱效還可以。 請(qǐng)色譜高人指點(diǎn),有金幣~~ |

木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
| 這個(gè)很容易想明白啊,你的樣品雜質(zhì)進(jìn)入柱子后和硅羥基結(jié)合,占據(jù)了過(guò)多的結(jié)合位點(diǎn),導(dǎo)致柱效降低,同時(shí)色譜柱壓力升高,你反沖有效果的原因是長(zhǎng)期正向使用使得C18鏈長(zhǎng)期向一個(gè)方向“倒伏”,反沖后不僅把雜質(zhì)可以沖出來(lái),而且可以使C18鏈“豎立”,個(gè)人認(rèn)為這種情況正常,柱子的壽命到了就會(huì)這樣。 |
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用了8個(gè)月這么長(zhǎng)時(shí)間了壓力升高很正常啊,天天使用的話肯定會(huì)有強(qiáng)保留成分保留在色譜柱上,而且色譜柱的塞板這么長(zhǎng)的時(shí)間也可能會(huì)有臟東西附著在上面。 很有可能你正向用塞板是造成壓力的主要原因,因?yàn)槲廴疚飼?huì)富集到塞板的進(jìn)口方向,所以你反方向沖壓力不會(huì)很高,但污染物沒(méi)有辦法沖出來(lái),所以一到正向使用又會(huì)升高。 |
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