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zzw1221木蟲 (著名寫手)
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[交流]
【求助/交流】BAC 質(zhì)粒抽提 已有10人參與
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| omega 公司的E.Z.N.A.® BAC/PAC DNA Kit這個(gè)試劑盒有人用過嗎，怎么樣，盼告知，謝謝 |
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zhaohq1209
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zzw1221(金幣+1): 2010-07-02 10:30:59
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呵呵~原來(lái)你給我發(fā)站內(nèi)信了啊，直接在帖子上回復(fù)就行了，如果別人需要的話也可以看到。 你提到的這個(gè)kit說明書上寫的可以提取》100kb的質(zhì)粒，對(duì)于你120kb的質(zhì)粒應(yīng)該也是可以的。你的BAC clone雖然是低拷貝的，宿主菌應(yīng)該是大腸吧，這樣過夜培養(yǎng)后的菌量是很大的，得到的產(chǎn)量應(yīng)該能達(dá)到數(shù)十微克。 我的菌生長(zhǎng)緩慢，50ml菌液集菌后跟一般大腸的5ml菌量相當(dāng)，能得到總量30多微克。 最后祝實(shí)驗(yàn)順利！ |
7樓2010-07-02 10:09:58
zhaohq1209
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dhd997(金幣+1):謝謝交流。 2010-07-01 22:30:19
zzw1221(金幣+1): 2010-07-02 10:04:51
dhd997(金幣+1):謝謝交流。 2010-07-01 22:30:19
zzw1221(金幣+1): 2010-07-02 10:04:51
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lz說的這個(gè)kit是美國(guó)產(chǎn)的，說明書上有兩種方法：一種是standard method，其實(shí)就是堿裂解+過柱純化，適用于拷貝數(shù)比較高的質(zhì)粒；另外一種適用于拷貝數(shù)低的質(zhì)粒，堿裂解+乙醇沉淀，但比手工提取的效果要好。其中的任何一種方法都比手工提取的純度要高，提取的核酸用來(lái)酶切和PCR沒有問題。 lz有什么需要可以跟我站內(nèi)聯(lián)系。祝實(shí)驗(yàn)順利！ [ Last edited by zhaohq1209 on 2010-7-1 at 22:25 ] |
3樓2010-07-01 22:24:17
tigertang
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4樓2010-07-02 09:15:24
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5樓2010-07-02 09:42:59
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