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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 核酸提取 » 質粒的提取及測序問題
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yumupeipei銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
質粒的提取及測序問題 已有2人參與
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| 最近在做轉化，挑取陽性單克隆搖菌后，菌液PCR有目的片段（1800bp），提質粒，電泳發(fā)現(xiàn)無條帶，可用該質粒做模板進行PCR能出現(xiàn)目的條帶，送樣進行測序，也總是反饋說信號太弱，這到底是怎么回事，還望各位大蝦指點！ |
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我覺得是不是需要確認一下做的膠是否正常，因為既然既然能用質粒pcr做出東西來，里面肯定還是存在著模板的，反應弱無非就是模板的濃度不夠或者是引物結合的效率有問題，根據你的描述我覺得濃度的原因更大，可以用目的基因的引物來P一下質粒，用其產物測序也是可以驗證一下的 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
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yumupeipei2樓2014-03-10 11:10:42
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