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yumupeipei銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
質(zhì)粒的提取及測(cè)序問題 已有2人參與
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| 最近在做轉(zhuǎn)化，挑取陽(yáng)性單克隆搖菌后，菌液PCR有目的片段（1800bp），提質(zhì)粒，電泳發(fā)現(xiàn)無(wú)條帶，可用該質(zhì)粒做模板進(jìn)行PCR能出現(xiàn)目的條帶，送樣進(jìn)行測(cè)序，也總是反饋說(shuō)信號(hào)太弱，這到底是怎么回事，還望各位大蝦指點(diǎn)！ |
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我覺得是不是需要確認(rèn)一下做的膠是否正常，因?yàn)榧热患热荒苡觅|(zhì)粒pcr做出東西來(lái)，里面肯定還是存在著模板的，反應(yīng)弱無(wú)非就是模板的濃度不夠或者是引物結(jié)合的效率有問題，根據(jù)你的描述我覺得濃度的原因更大，可以用目的基因的引物來(lái)P一下質(zhì)粒，用其產(chǎn)物測(cè)序也是可以驗(yàn)證一下的 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
yumupeipei2樓2014-03-10 11:10:42
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