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水水726新蟲(chóng) (小有名氣)
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【求助】毛細(xì)管電泳的幾個(gè)問(wèn)題 已有3人參與
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| 請(qǐng)教幾個(gè)毛細(xì)管電泳的問(wèn)題：緩沖液選擇原則是什么？分析物質(zhì)偏酸性堿性或中性時(shí)，分別選擇什么樣的緩沖液？為什么？峰形保留時(shí)間不好或出峰情況不好時(shí)，該怎么調(diào)整？？謝謝各位指教！ |
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小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
happy169(金幣+2, ACI+1):thanks！ 2010-07-20 15:31:06
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happy169(金幣+2, ACI+1):thanks！ 2010-07-20 15:31:06
| 一般首先優(yōu)化buffer的pH，最常使用的是磷酸鹽緩沖體系，但是磷酸鹽緩沖體系需要較長(zhǎng)的平衡時(shí)間，然后優(yōu)化離子強(qiáng)度，還有添加劑等條件；酸性物質(zhì)在高pH下會(huì)帶有負(fù)電荷，在高pH下，EOF指向陰極，因此可以加速被測(cè)物質(zhì)的出峰，所以一般首選堿性buffer進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，不過(guò)酸性物質(zhì)也可以在中性或偏酸性的buffer中得到分離；中性物質(zhì)在分離時(shí)必須依靠電滲流，因此buffer的pH最好能高于3.5。峰形不好的原因很多，需要具體問(wèn)題具體分析。保留時(shí)間不穩(wěn)定一般是因?yàn)闆](méi)有平衡好capillary所造成的，可以增大平衡時(shí)間。還有電壓要選擇好！ |
2樓2010-07-19 22:08:31
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3樓2010-07-20 10:19:50
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4樓2010-07-20 11:45:56
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