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[交流]
【求助】毛細管電泳的幾個問題 已有3人參與
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| 請教幾個毛細管電泳的問題:緩沖液選擇原則是什么?分析物質(zhì)偏酸性堿性或中性時,分別選擇什么樣的緩沖液?為什么?峰形保留時間不好或出峰情況不好時,該怎么調(diào)整??謝謝各位指教! |
銅蟲 (小有名氣)
木蟲 (著名寫手)
一竅不通
| 一般首先優(yōu)化buffer的pH,最常使用的是磷酸鹽緩沖體系,但是磷酸鹽緩沖體系需要較長的平衡時間,然后優(yōu)化離子強度,還有添加劑等條件;酸性物質(zhì)在高pH下會帶有負電荷,在高pH下,EOF指向陰極,因此可以加速被測物質(zhì)的出峰,所以一般首選堿性buffer進行實驗,不過酸性物質(zhì)也可以在中性或偏酸性的buffer中得到分離;中性物質(zhì)在分離時必須依靠電滲流,因此buffer的pH最好能高于3.5。峰形不好的原因很多,需要具體問題具體分析。保留時間不穩(wěn)定一般是因為沒有平衡好capillary所造成的,可以增大平衡時間。還有電壓要選擇好! |

木蟲 (著名寫手)
一竅不通

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