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cxbaoa金蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助】緊急求助!關于紫外末端吸收。 已有4人參與
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手頭兩個藥物,異環(huán)磷酰胺和環(huán)孢素A,需要利用紫外測藥物濃度。 兩年前我就做過異環(huán)磷酰胺,沒做出來,利用紫外做標準曲線求濃度的。因為異環(huán)磷酰胺是在204nm的最大吸收峰,標準曲線能做出來,但是做藥物緩釋的時候濃度通過標準曲線計算就忽大忽小,得不出緩釋的規(guī)律。當時網上查了一下有人說200-210是紫外末端吸收,數(shù)據(jù)是不可靠的,還嘗試過高效液相色譜,都沒做出確切的數(shù)據(jù),實驗因此就擱置了。 現(xiàn)在導師又提起來,還加了一個環(huán)孢素A,我一查,暈,又是一個紫外吸收很弱的,導師認為我的實驗有問題而不是紫外的原因,他甚至拿出他的博士論文,說他以前在190nm測聚丙烯酰胺的濃度都沒問題。而且說高效液相也是紫外檢測器,原理一樣的。絕對是我實驗的問題。現(xiàn)在有些頭大。 請教大家, 1:做紫外:200左右的吸收峰是不是只要標準曲線能做出來,相關度也還不錯,那就是可以測出濃度的?(不要求每個點的精確性,要求得到一個規(guī)律性的趨勢就行。)確實是我自己試驗的問題而與紫外無關? (另外目前的試驗條件只能利用紫外分光光度計。) 2:如何正確理解紫外末端吸收? 謝謝大家!! |


金蟲 (正式寫手)
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1.含測問題:當檢測波長<203nm,使用紫外檢測器的高效液相法眾人皆知是有問題的,你的導師說:"在190nm測聚丙烯酰胺的濃度,采用紫外檢測器的高效液相法都沒問題",人間傳奇!化學藥品,試樣組成簡單,主成分若有紫外吸收,一般采用紫外分光的方法就可搞定,不需“興師動眾”,若有二次干擾吸收,可采用雙波長或三波長紫外分光光度法;若是一次干擾吸收(線性背景),可采用一階導數(shù)紫外分光光度法。 2:如何正確理解紫外末端吸收? 這很簡單,峰位于遠紫外光區(qū)(10-200nm),在近紫外光區(qū)(200-400nm)只檢測到該峰末端部分,這部分的吸收被稱為~,一般由n→σ*躍遷所產生。 [ Last edited by zhbsky on 2010-7-24 at 05:56 ] |
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