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cxbaoa金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
【求助】緊急求助！關(guān)于紫外末端吸收��！ 已有4人參與
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手頭兩個(gè)藥物，異環(huán)磷酰胺和環(huán)孢素A，需要利用紫外測(cè)藥物濃度。 兩年前我就做過(guò)異環(huán)磷酰胺，沒(méi)做出來(lái)，利用紫外做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求濃度的。因?yàn)楫惌h(huán)磷酰胺是在204nm的最大吸收峰，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)能做出來(lái)，但是做藥物緩釋的時(shí)候濃度通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算就忽大忽小，得不出緩釋的規(guī)律。當(dāng)時(shí)網(wǎng)上查了一下有人說(shuō)200-210是紫外末端吸收，數(shù)據(jù)是不可靠的，還嘗試過(guò)高效液相色譜，都沒(méi)做出確切的數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)因此就擱置了。 現(xiàn)在導(dǎo)師又提起來(lái)，還加了一個(gè)環(huán)孢素A，我一查，暈，又是一個(gè)紫外吸收很弱的，導(dǎo)師認(rèn)為我的實(shí)驗(yàn)有問(wèn)題而不是紫外的原因，他甚至拿出他的博士論文，說(shuō)他以前在190nm測(cè)聚丙烯酰胺的濃度都沒(méi)問(wèn)題。而且說(shuō)高效液相也是紫外檢測(cè)器，原理一樣的。絕對(duì)是我實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題。現(xiàn)在有些頭大。 請(qǐng)教大家， 1：做紫外：200左右的吸收峰是不是只要標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)能做出來(lái)，相關(guān)度也還不錯(cuò)，那就是可以測(cè)出濃度的？（不要求每個(gè)點(diǎn)的精確性，要求得到一個(gè)規(guī)律性的趨勢(shì)就行。）確實(shí)是我自己試驗(yàn)的問(wèn)題而與紫外無(wú)關(guān)？ （另外目前的試驗(yàn)條件只能利用紫外分光光度計(jì)。） 2：如何正確理解紫外末端吸收？ 謝謝大家��！ |
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2樓2010-07-20 12:04:22
3樓2010-07-20 12:31:15
zhbsky
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如何正確理解紫外末端吸收？
cxbaoa(金幣+2):感謝 2010-07-25 22:08:14
cxbaoa(金幣+2):非常感謝 2010-07-25 22:08:43
cxbaoa(金幣+2):非常感謝 2010-07-25 22:08:43
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1.含測(cè)問(wèn)題:當(dāng)檢測(cè)波長(zhǎng)＜203nm，使用紫外檢測(cè)器的高效液相法眾人皆知是有問(wèn)題的，你的導(dǎo)師說(shuō)："在190nm測(cè)聚丙烯酰胺的濃度，采用紫外檢測(cè)器的高效液相法都沒(méi)問(wèn)題"，人間傳奇！化學(xué)藥品，試樣組成簡(jiǎn)單，主成分若有紫外吸收，一般采用紫外分光的方法就可搞定，不需“興師動(dòng)眾”，若有二次干擾吸收，可采用雙波長(zhǎng)或三波長(zhǎng)紫外分光光度法；若是一次干擾吸收（線(xiàn)性背景），可采用一階導(dǎo)數(shù)紫外分光光度法。 2：如何正確理解紫外末端吸收？ 這很簡(jiǎn)單，峰位于遠(yuǎn)紫外光區(qū)（10-200nm),在近紫外光區(qū)（200-400nm）只檢測(cè)到該峰末端部分，這部分的吸收被稱(chēng)為~，一般由n→σ*躍遷所產(chǎn)生。 [ Last edited by zhbsky on 2010-7-24 at 05:56 ] |
4樓2010-07-23 23:40:19
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7樓2013-01-06 11:22:31
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