 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3236 | 回復(fù): 8 | |||
[交流]
【求助/交流】最近我的MTT是這樣做的，結(jié)果很慘 已有4人參與
|
|
之前多次做過MTT，結(jié)果時(shí)好時(shí)壞 這次實(shí)驗(yàn)是用的耐藥細(xì)胞株做的MTT 測四種藥物對(duì)細(xì)胞的IC50 第一種：拓?fù)涮婵�，藥物水溶性不是很好，放置十分鐘可看到沉淀，但搖動(dòng)后肉眼觀察是均勻的。前面曾經(jīng)做過，藥物的吸光值會(huì)對(duì)結(jié)果影響很大，出現(xiàn)藥物濃度越高，吸光值越高的情況。 本次實(shí)驗(yàn)：細(xì)胞鋪板密度5000個(gè)每孔，96孔板，24小時(shí)后給藥，藥物濃度設(shè)為7個(gè)。給藥后24小時(shí)，我將含藥培養(yǎng)液全部吸出，并用PBS洗滌一遍，吸掉PBS后，加入MTT，4小 時(shí)后加DMSO測吸光值。 490nm時(shí)，明顯，還是隨藥物濃度升高OD值升高，藥物濃度很大時(shí)（1mg/ml），OD值最高，3點(diǎn)幾，4點(diǎn)幾了。 570nm時(shí)，藥物濃度越高OD值越高，但藥物濃度很大時(shí)（1mg/ml），相對(duì)（0.1mg/ml）的OD值也變化不大，都在2點(diǎn)幾，接近3。 第二種：表阿霉素，細(xì)胞鋪板及處理方式均是一樣的，也用PBS洗了。 在藥物濃度小于（10微克/ml）時(shí)，OD值隨藥物濃度增加而減少，有抑制細(xì)胞生長的結(jié)果。但在藥物濃度增大到100微克/ml以上時(shí)，吸光值也開始增加了。如果藥物到了1mg/ml。吸光值飚升。 第三種第四種是我們新的藥物，看到的結(jié)果是反而促進(jìn)細(xì)胞增長。這個(gè)很難說。怪我當(dāng)時(shí)沒有用顯微鏡觀察下，細(xì)胞有沒有死。 很著急的，就是做不出點(diǎn)好結(jié)果，自己也琢磨不出來。 希望各位指點(diǎn)指點(diǎn)，不勝感激。 [ Last edited by 蝸牛VS蝸牛 on 2010-7-24 at 09:45 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有69人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 求助mtt實(shí)驗(yàn)結(jié)果無法重復(fù)的原因
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 96孔板接種細(xì)胞
已經(jīng)有6人回復(fù)
- MTT實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【我是這樣做科研的】新文獻(xiàn)、新想法、新觀點(diǎn)、新結(jié)果
已經(jīng)有57人回復(fù)
- MTT跟流式結(jié)果相反
已經(jīng)有4人回復(fù)
- MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果怎么看？
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助】為什么MTT試驗(yàn)只出現(xiàn)一次劑量依賴性結(jié)果？請(qǐng)教
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】MTT結(jié)果分析，藥物機(jī)理解釋
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 【求助/交流】MTT法確定藥物對(duì)細(xì)胞的作用濃度范圍 結(jié)果如何分析
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 【求助】脂質(zhì)體載藥的MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為什么72h的細(xì)胞毒性低于24h,48h的毒性。
已經(jīng)有6人回復(fù)
- MTT實(shí)驗(yàn)的空白對(duì)照值很高，結(jié)果還可信嗎？
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助】MTT結(jié)果分析的問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
三磷酸腺苷
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 7
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 貴賓: 0.021
- 金幣: 7298.5
- 散金: 9
- 紅花: 13
- 帖子: 4032
- 在線: 224.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 551611
- 注冊(cè): 2008-04-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤（含特殊感受
★ ★ ★
蝸牛VS蝸牛(金幣+5): 2010-07-24 11:21:21
1949stone(金幣+3):夠朋友 2010-07-24 13:20:22
蝸牛VS蝸牛(金幣+5): 2010-07-24 11:21:21
1949stone(金幣+3):夠朋友 2010-07-24 13:20:22
|
MTT的吸光度一般以不超過1或者1.2為宜，過頭了就是不準(zhǔn)的了�？梢栽囋嚨鸵稽c(diǎn)細(xì)胞密度，如1000個(gè)細(xì)胞。另外就是加DMSO的時(shí)候加多一點(diǎn)，比如200ul/孔 細(xì)胞數(shù)的控制其實(shí)也要根據(jù)細(xì)胞的個(gè)頭來確定的。一般藥物處理24h的話，可以在種板的時(shí)候控制給藥當(dāng)天細(xì)胞密度大概在50%左右即可。細(xì)胞太密堆起來的話，做什么實(shí)驗(yàn)都不準(zhǔn)確 如果你的藥物跟MTT之間沒有什么交互作用的話，不要用PBS洗了，因?yàn)?6孔板很容易吸掉細(xì)胞，又引入誤差。 MTT實(shí)驗(yàn)總之就是一個(gè)細(xì)致，包括從種細(xì)胞開始，記得將誤差平均分到每個(gè)組每個(gè)復(fù)孔，比如種組1的第一個(gè)，組2的第一個(gè)，組3的第一個(gè)……組1的第二個(gè)……還有就是在種的過程中不斷搖晃要接種的細(xì)胞懸液，保證均勻。96孔種下去的細(xì)胞不要搖，因?yàn)檫@種小孔板一搖細(xì)胞就容易堆在一起不均勻。 另外就是換液的操作槍頭不要戳到板底，最后一步加DMSO前的棄上清也要特別小心，我們是用負(fù)壓很小心來吸的，用槍頭萬一用力過猛就把一片結(jié)晶吸走了 接lz站內(nèi)信，上來回復(fù)~~~~ 還是論壇交流吧 |
2樓2010-07-24 10:06:40
3樓2010-07-24 11:20:59
三磷酸腺苷
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 7
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 貴賓: 0.021
- 金幣: 7298.5
- 散金: 9
- 紅花: 13
- 帖子: 4032
- 在線: 224.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 551611
- 注冊(cè): 2008-04-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤（含特殊感受
4樓2010-07-24 11:24:31
windbells636
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1089.9
- 散金: 145
- 紅花: 2
- 帖子: 169
- 在線: 50.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1047896
- 注冊(cè): 2010-06-26
- 性別: MM
- 專業(yè): 細(xì)胞生長與分裂
5樓2010-09-17 16:13:04
6樓2013-12-10 22:49:21
7樓2013-12-10 22:57:42
8樓2013-12-10 23:00:55
單曲循環(huán)mwp
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 5878.5
- 散金: 137
- 紅花: 3
- 帖子: 779
- 在線: 270.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1497085
- 注冊(cè): 2011-11-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 神經(jīng)精神藥物藥理
9樓2017-10-21 09:15:47
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 蝸牛VS蝸牛 的主題更新
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +5 | prayer13 2026-03-23 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 一志愿河北工業(yè)大學(xué)0817化工278分求調(diào)劑 +5 | jhybd 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿南航材料專317分求調(diào)劑 +3 | 炸呀炸呀炸薯?xiàng)l 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 335分 | 材料與化工專碩 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷 +3 | cccchenso 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
[考研] 招08考數(shù)學(xué) +6 | laoshidan 2026-03-20 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 +3 | α____ 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +6 | lucky呀呀呀鴨 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | Auroracx 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 山東省面上項(xiàng)目限額評(píng)審 +4 | 石瑞0426 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 280求調(diào)劑 +11 | 咕嚕曉曉 2026-03-18 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 材料 271求調(diào)劑 +5 | 展信悅_ 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 哇呼哼呼哼 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +10 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +6 | △小透明* 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 二本跨考鄭大材料306英一數(shù)二 +3 | z1z2z3879 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)，080502，354分求調(diào)劑 +5 | 守候夕陽CF 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +5 | 申子申申 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考博] 申博26年 +3 | 八6八68 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科鄭州大學(xué)物理學(xué)院，一志愿華科070200學(xué)碩，346求調(diào)劑 +4 | 我不是一根蔥 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料，紡織，生物（0856、0710），化學(xué)招生啦 +3 | Eember. 2026-03-17 | 9/450 |
|