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njxmhl木蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】如何獲得單菌落 已有5人參與
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| 本人在做黑曲霉和木霉平板酶活水解圈時(shí),發(fā)現(xiàn)黑曲霉和木霉在平板上長(zhǎng)成一片,不是單菌落,特向各位請(qǐng)教,如何才能黑曲霉和木霉在平板上長(zhǎng)成單菌落? |
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金蟲 (正式寫手)

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三點(diǎn)接種法: 要獲得霉菌的單菌落,宜在平板上用三點(diǎn)接種法接種。即用接種針沾取少量霉菌孢子,在瓊脂平板上點(diǎn)成等邊三角形的三點(diǎn)。經(jīng)培養(yǎng)后,每皿形成三個(gè)菌落。其優(yōu)點(diǎn)不但在一個(gè)培養(yǎng)皿上同種菌落有三個(gè)重復(fù),更重要的是在菌落彼此相接近的邊緣,常留有一條狹的空白地帶,此處菌絲生長(zhǎng)稀疏,較透明,還分化出稀落的典型子實(shí)器,因此可以直接把培養(yǎng)皿放在低倍鏡下觀察,便于根據(jù)形態(tài)特點(diǎn)進(jìn)行菌種的鑒定。這是單點(diǎn)接種法所難以做到的。 三點(diǎn)接種:用接種針從菌種斜面上分別挑取少量菌種孢子, 點(diǎn)接到對(duì)應(yīng)的平板上。操作要點(diǎn)為: ① 標(biāo)明三點(diǎn)位置:欲使點(diǎn)接的三點(diǎn)分布均勻,可用記號(hào)筆先在平板底部以等邊三角形狀 標(biāo)上三點(diǎn)。 ② 取接種針:拿接種針,先在火焰上燒紅滅菌,并在平板培養(yǎng)基的邊緣冷卻且蘸濕。 ③ 沾取孢子:將滅過菌并蘸濕的接種針伸入菌種管,用針尖沾取少量霉菌孢子。 ④ 點(diǎn)接:以垂直法或水平法把接種針上沾著的孢子以垂直的方向輕輕 的點(diǎn)接到平板培養(yǎng)基表面預(yù)先做好標(biāo)記的部位。注意在點(diǎn)接時(shí)切勿刺破培養(yǎng)基。 培養(yǎng):將點(diǎn)接好的平板倒置于28℃恒溫箱中培養(yǎng)。48小時(shí)后開始觀察生長(zhǎng)情況。 恒溫箱中培養(yǎng)霉菌25~28℃ |

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