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syhdeg木蟲 (小有名氣)
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[交流]
【資源】DNA制品的處理 已有5人參與
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1.Q: Oligo DNA制品的形態(tài)? A: Oligo DNA制品呈現(xiàn)白色粉末或無色透明均為正常形態(tài)。Oligo DNA制品為白色粉末或絮狀物，一方面客戶能肉眼觀察到白色制品，另一方面保證Oligo DNA能即刻溶解。但由于Oligo DNA制品受空氣中水份的影響，制品被潮解而吸附于離心管壁或管蓋上，呈現(xiàn)無色透明狀或難以觀察到，遇到這種情況時(shí)請(qǐng)?jiān)谑褂们跋入x心收集Oligo DNA制品于管底，然后溶解Oligo DNA制品。 2.Q: 如何稀釋Oligo DNA制品? A: 收到Oligo DNA后，首先請(qǐng)短暫離心，收集Oligo DNA制品于管底，然后慢慢打開管蓋，加適量的無菌超純水或TE緩沖液，蓋上管蓋，充分上下振蕩或用手指彈管底，使Oligo DNA充分溶解。相關(guān)的說明及數(shù)據(jù)請(qǐng)參照我公司的DNA合成報(bào)告單。 3.Q: 怎樣制備100μM的儲(chǔ)備液? A: 體積（μl）=DNA合成報(bào)告單上的nmol數(shù)目×10 4.Q: Oligo DNA制品如何保存? A: (1) Oligo DNA干燥制品很穩(wěn)定，常溫下可保存數(shù)月，但最好置于-20℃保存。 (2) 溶解后的DNA溶液可于4℃短期保存，長期保存請(qǐng)置于-20℃。在溶解和使用DNA溶液時(shí)，請(qǐng)避免核酸酶污染，盡量減少DNA溶液的反復(fù)凍融。 (3) 熒光標(biāo)記Oligo DNA對(duì)光敏感，在日光下熒光強(qiáng)度會(huì)降低。為了保持熒光標(biāo)記Oligo DNA的熒光效率，請(qǐng)于-20℃避光保存。 5.Q: Oligo DNA制品在常溫下放置了一周還能正常工作嗎？ A: Oligo DNA的干燥制品是非常穩(wěn)定的，即便在溶液中也很穩(wěn)定。一般情況下，只要沒有核酸酶、細(xì)菌等的污染，Oligo DNA制品于常溫下放置一周仍然能夠正常工作，但長期保存請(qǐng)最好置于-20℃。 6.Q: Oligo DNA制品可以用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)嗎？ A: 由于化學(xué)合成的寡核苷酸所具有的特性，不能使用Agarose Gel及EB染色方法進(jìn)行質(zhì)量和濃度檢測(cè)，必要時(shí)請(qǐng)使用變性PAGE電泳檢測(cè)。主要原因如下： (1) Oligos是單鏈DNA，容易形成立體結(jié)構(gòu)。跑瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，容易出現(xiàn)多條帶。 (2) Oligos為單鏈，而EB染色是嵌入到DNA雙鏈的堿基之間。因此，單鏈DNA形成的立體結(jié)構(gòu)越復(fù)雜，EB染色就越容易，DNA條帶就越亮。如果單鏈DNA不形成立體結(jié)構(gòu)，EB就無法染色。 7.Q: 長度相同、堿基組成不同的Oligo DNA進(jìn)行變性PAGE電泳時(shí)，電泳帶應(yīng)該在同一位置嗎？ A: 對(duì)于短鏈DNA來說，會(huì)有差異，但長鏈DNA差別很小，主要原因如下： (1) A、G、T、C組成不同，電泳速度不同。 (2) DNA立體結(jié)構(gòu)不同，電泳速度不同。 (3) 標(biāo)記的熒光素不同。 |
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2樓2010-11-02 11:06:00
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3樓2010-11-03 09:14:04
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4樓2010-11-08 10:42:15
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5樓2010-11-08 10:53:30
謝謝啦！ 6樓2010-11-29 09:24:37
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