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[交流]
【求助/交流】轉染后的Hela S3行免疫熒光后在顯微鏡下觀察,無圖像,失敗原因探討。 已有5人參與
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| 我是分子生物實驗新手,今天對轉染后的Hela S3進行免疫熒光,然后在顯微鏡下觀察,任何細胞的影子都沒有,覺得奇怪的地方是,我想不出原因,因為此前進行兩次類似的實驗都有細胞成像,這次步驟上完全是重復以往的,除了轉染的基因不同以外,其他都一樣。上周五對細胞進行固定,分別應用4%PFA, 0.5% Triton X-20, 1% Perfect Blocking,進行固定,后存入冰箱冷藏,這周一開始加一抗和二抗,以及核染色。此前做過兩次,步驟相同,都獲成功,此次失敗不知有哪些原因可以導致,請高手們指教!多謝! |
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金蟲 (小有名氣)

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