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[交流]
【求助/交流】引物設(shè)計(jì)原則說3‘端避開密碼子第3位,何解? 已有9人參與
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| 不明白這密碼子第3位是什么意思?是不是起始密碼為ATG,引物3’ 端就不能是G呢?新手上路,多多指教! |
木蟲 (著名寫手)
木蟲 (知名作家)
金蟲 (正式寫手)
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Crick對(duì)于tRNA能識(shí)別幾種密碼子的現(xiàn)象,提出堿基配對(duì)的“擺動(dòng)學(xué)說”: 認(rèn)為除A-U、G-C配對(duì)外,還有非標(biāo)準(zhǔn)配對(duì),I-A、I-C、I-U,并強(qiáng)調(diào)密碼子的5’端第1、2個(gè)堿基嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)配對(duì),而第3個(gè)堿基可以非標(biāo)準(zhǔn)配對(duì),具有一定程度的擺動(dòng)靈活性。 |
木蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
金蟲 (正式寫手)
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5樓搞錯(cuò)了,不是引物的第一個(gè)堿基。其他人的意見可能正確。 以下來自百度:“擴(kuò)增編碼區(qū)域,引物3′端不要終止于密碼子的第3位,因密碼子的第3位易發(fā)生簡(jiǎn)并,會(huì)影響擴(kuò)增的特異性與效率! 但我不太明白了: 1,我們PCR擴(kuò)增DNA序列,用的是dNTPs,也就是ATGC的混合液,這不存在所謂tRNA的非標(biāo)準(zhǔn)配對(duì),因?yàn)椴皇荝NA轉(zhuǎn)錄,而是DNA復(fù)制。 2,tRNA上才存在所謂擺動(dòng)原則吧,這跟PCR中的DNA復(fù)制有關(guān)系嗎? 所以,對(duì)于我們體外擴(kuò)增DNA,“引物3‘端要避開密碼子第三位”這個(gè)說法,我暫時(shí)不能贊同! 求指點(diǎn)。 |

銀蟲 (小有名氣)
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