 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3311 | 回復(fù): 18 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
[求助]
兩種引物的PCR電泳圖，做了多次還是不解
|
|||
|
下面我的PCR電泳圖，彩色圖第一個(gè)是Marker，誠然Marker跑得不好，買來直接用，可是每次都跑不開。 因?yàn)槲易龅氖荰-RFLP即末端限制性酶切技術(shù)，所以用的是帶熒光的引物，選擇時(shí)我參考的文獻(xiàn)人家也選擇的這樣的，P出的片段大約是1.5KB，左起第2,3個(gè)是DNA的PCR，4,5是空白，可是為什么有條帶，做了很多次都這樣。后面四個(gè)是用另一種引物做的，不帶熒光，P出的片段是100多bp，靠右邊兩個(gè)是空白。 不知道有沒有人也是做T-RFLP的，能否傳授些寶貴經(jīng)驗(yàn)，后面就是要切割膠片進(jìn)行純化，然后對PCR產(chǎn)物進(jìn)行酶切，可是PCR這是做不好，下面一直無法進(jìn)行下去。 附上之前做過的黑白圖，用的是帶熒光的引物做的，每次都呈現(xiàn)這樣的圖，之前我也沒觀察顏色的不同，一直解不開謎團(tuán)。這樣分析的話是不是跑得比較慢的是我需要的片段呢，如何去除不需要的熒光片段呢？ [ Last edited by 樹寶寶zyx on 2011-10-16 at 12:30 ] |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有211人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
天津商業(yè)大學(xué) 生物與醫(yī)藥課題組招生
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 合成一段DNA的問題？引物，PCR
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 按照引物PCR后，為什么電泳圖里只有想要的片段，原來的CDNA或基因組DNA消失了呢？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 最近在做PCR，同樣的體系，同樣的模板，引物1能擴(kuò)出來。引物2、3做不出來，去原因
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 這樣的RNA電泳圖，能不能做RT-PCR
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】大家來看下我的RNA電泳圖
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】是PCR條件不對還是引物的原因？（附電泳圖）
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助/交流】請問PCR后的電泳只目的片段不清晰，并且出現(xiàn)引物帶，應(yīng)該從哪些方面調(diào)整
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】ISSR引物擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖，求助各位高手~~~
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】為什么PCR引物不能反復(fù)凍融？后果會是怎樣
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】大家?guī)兔聪挛业腜CR電泳圖，急！做了7.8次還是這樣。
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】做過大引物全質(zhì)粒PCR的進(jìn)來看
已經(jīng)有29人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR只有引物二聚體，有圖
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR引物設(shè)計(jì)出來了，但酶切之后電泳沒條帶啊
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】問個(gè)問題,測PCR產(chǎn)物序列的時(shí)候會不會測出引物的序列?
已經(jīng)有16人回復(fù)
mamadexiao
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 53 (初中生)
- 金幣: 5603.5
- 散金: 100
- 紅花: 7
- 帖子: 418
- 在線: 78.8小時(shí)
- 蟲號: 576831
- 注冊: 2008-06-21
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
5樓2011-10-16 14:39:03
2樓2011-10-16 12:49:29
doublehelix
木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 16 (小學(xué)生)
- 金幣: 4035.7
- 散金: 666
- 紅花: 6
- 帖子: 1201
- 在線: 167小時(shí)
- 蟲號: 79445
- 注冊: 2005-07-10
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2011-10-16 13:58:56
ganchao1776
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 12
- 應(yīng)助: 18 (小學(xué)生)
- 金幣: 11618.1
- 散金: 1811
- 紅花: 30
- 帖子: 3403
- 在線: 900.8小時(shí)
- 蟲號: 330935
- 注冊: 2007-03-24
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
4樓2011-10-16 14:33:43
6樓2011-10-16 18:32:05
大孫20111987
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 643.3
- 紅花: 1
- 帖子: 143
- 在線: 32.3小時(shí)
- 蟲號: 1413382
- 注冊: 2011-09-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學(xué)
7樓2011-10-16 18:59:08
樹寶寶zyx(金幣+3): 2011-10-17 12:50:30
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
8樓2011-10-17 09:34:35
|
電泳液是配的50倍的保存在4°C冰箱，需要的時(shí)候稀釋了再用的。不過那個(gè)配了倒是有2個(gè)多月了，是不是有關(guān)系呢。制膠和電泳液下次我盡量用統(tǒng)一配的，有時(shí)候不是同一次配的可能濃度稍有不同。下面是我新做的PCR，用的都是一樣的引物。自左起前兩個(gè)是空白，接下來四個(gè)是用降落式的溫度。第7,8是兩個(gè)空白，最后四個(gè)是恒溫循環(huán)。94°C，3min；94°C 45s，54°C 30S，72°C 1min；72°C 10min�？粗鴳�(yīng)該是恒溫條件效果好，不知道這個(gè)拖尾問題如何解決。而且空白總是有條帶。。。東西我都是新近買的，自從買來以后開始做就從來都是有條帶，都不知道為什么。。 |
9樓2011-10-17 12:49:46
10樓2011-10-17 13:02:11
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 樹寶寶zyx 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085601 材料工程 313分 求調(diào)劑 +7 | Ong3 2026-03-27 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 材料化工340求調(diào)劑 +4 | jhx777 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +8 | 呼吸都是減肥 2026-04-01 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿同濟(jì)大學(xué)323分（080500）求調(diào)劑 +5 | yikeniu 2026-04-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 學(xué)員97LZgn 2026-04-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +9 | 月月鳥木 2026-04-01 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料考研調(diào)劑 +9 | Gs大王 2026-04-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿北交大材料工程，總分358 +4 | cs0106 2026-04-01 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 生物與醫(yī)藥考研調(diào)劑 +5 | 鐵憨憨123425 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 309求調(diào)劑 +19 | 誰不是少年 2026-03-29 | 19/950 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 圖鑒212 2026-03-30 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 省雙一流重點(diǎn)一本大學(xué)招收調(diào)劑 +4 | wwwwffffff 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿北交材料工程總分358 +5 | cs0106 2026-04-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工調(diào)劑一志愿大連海事085600，349 +9 | 吃的不少 2026-03-30 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +7 | 雙馬尾痞老板2 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 生物學(xué) 377分 +6 | zzll03 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 物理學(xué)調(diào)劑
+4
|
小羊36 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 學(xué)碩274求調(diào)劑 +17 | Li李魚 2026-03-26 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +6 | Faune 2026-03-30 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +5 | 丟掉懶惰 2026-03-27 | 8/400 |
|