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兩種引物的PCR電泳圖，做了多次還是不解
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下面我的PCR電泳圖，彩色圖第一個(gè)是Marker，誠然Marker跑得不好，買來直接用，可是每次都跑不開。 因?yàn)槲易龅氖荰-RFLP即末端限制性酶切技術(shù)，所以用的是帶熒光的引物，選擇時(shí)我參考的文獻(xiàn)人家也選擇的這樣的，P出的片段大約是1.5KB，左起第2,3個(gè)是DNA的PCR，4,5是空白，可是為什么有條帶，做了很多次都這樣。后面四個(gè)是用另一種引物做的，不帶熒光，P出的片段是100多bp，靠右邊兩個(gè)是空白。 不知道有沒有人也是做T-RFLP的，能否傳授些寶貴經(jīng)驗(yàn)，后面就是要切割膠片進(jìn)行純化，然后對PCR產(chǎn)物進(jìn)行酶切，可是PCR這是做不好，下面一直無法進(jìn)行下去。 附上之前做過的黑白圖，用的是帶熒光的引物做的，每次都呈現(xiàn)這樣的圖，之前我也沒觀察顏色的不同，一直解不開謎團(tuán)。這樣分析的話是不是跑得比較慢的是我需要的片段呢，如何去除不需要的熒光片段呢？ [ Last edited by 樹寶寶zyx on 2011-10-16 at 12:30 ] |
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