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coolgongjun木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助】請教關于脂質體純化的問題
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| 由于實驗室以前做我這個方向的很少,我又剛進來,所以有個有點幼稚的問題:文獻上報道除去脂質體內未包裹的藥物或者未鑲嵌的修飾物都要用到sephadex或sepharose凝膠柱,這些柱子是用到凝膠滲透色譜中嗎?那樣的話恐怕有點難度因為凝膠滲透色譜很貴,實驗室不可能買,學校的也不可能讓我們換柱子吧。能夠直接像柱色譜那樣用嗎？（我看的文獻有些明確指出需要凝膠滲透色譜，也有的語焉不詳只是說要通過凝膠柱來提純。）謝謝！ |
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5樓2010-08-22 09:09:49
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★
coolgongjun(金幣+10):謝謝!辛苦了! 2010-09-02 08:06:02
qinhy(金幣+1):多謝指教，歡迎常來藥學版！ 2010-12-29 17:18:00
coolgongjun(金幣+10):謝謝!辛苦了! 2010-09-02 08:06:02
qinhy(金幣+1):多謝指教，歡迎常來藥學版！ 2010-12-29 17:18:00
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我做的是微量的，用離心機2000r/min轉3分鐘，脂質體就下來了，大點兒的柱子我不清楚，我沒做過，不好意思 找了下以前的實驗記錄，你參考一下吧 凝膠微型柱的制備 原理：由于凝膠中有許多小孔，體積較大的脂質體不進入小孔而從間隙中先流出，而體積較小的未包裹的藥物及雜質進入小孔后流出而達到分離的目的。 制備：取Sephagex G-50適量，填入1ml塑料注射器中，此注射器事先取芯后塞入一小塊棉花。將注射器放入離心機中，再2000r/min離心3min，除去過量的生理鹽水，柱床高度達0.8ml刻度線位置。 飽和微型柱 原理：由于凝膠表面上的許多位點能與脂質體膜相互作用結合，照成小量的脂質體丟失。因此用空白脂質體預先飽和柱的表面，避免由于吸附照成的脂質體丟失現(xiàn)象的發(fā)生。 操作：分取空白脂質體0.1ml，加到微型柱上，在2000r/min離心3min，再加入0.2ml的緩沖液洗滌微型柱。 分離純化脂質體 將脂質體各取0.1ml置微型柱離心分離，收集第一管，理論上極為純化的脂質體。 |
11樓2010-09-01 16:08:42
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