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帥博士木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
【求助】關(guān)于蛋白質(zhì)酶解的問(wèn)題 已有3人參與
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蛋白質(zhì)酶解有沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)手段？ 對(duì)于β-酪蛋白的酶解過(guò)程，有文獻(xiàn)采用加熱變性后，再用胰蛋白酶酶解；但最近看到也有文獻(xiàn)采用DTT還原變性后，加入IAA烷基化，再采用胰蛋白酶酶解。這兩中方法有什么差異？蟲(chóng)子們認(rèn)為哪個(gè)方法好，然后，不變性應(yīng)當(dāng)也能酶解吧。 [ Last edited by amisking on 2010-8-25 at 20:47 ] |
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2樓2017-03-21 22:04:21
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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-03-22 07:49:50
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DTT的加入是為了打開(kāi)二硫鍵，再進(jìn)行酶解的話，酶解更完全。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
3樓2017-03-22 06:57:44
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4樓2017-03-22 08:41:19
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5樓2017-03-22 09:25:01
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不變性也可以，只是酶解效率低，畢竟有空間位阻，胰蛋白酶專(zhuān)一作用在精氨酸和賴(lài)氨酸的羧基端。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
6樓2017-03-22 16:15:56
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加入IAA的目的是烷基化，也就是把DTT打開(kāi)的二硫鍵烷化，防止再次形成二硫鍵。 并不是把酶加進(jìn)去就能酶解，你要考慮酶量、溫度，體系PH、反應(yīng)時(shí)間等等。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
7樓2017-03-22 16:23:53
hyg海銀
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8樓2017-03-22 17:23:23
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9樓2018-09-17 19:38:49
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