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lysogen金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】試驗(yàn)失敗了，請(qǐng)高手指點(diǎn) 已有3人參與
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做分子試驗(yàn)時(shí)，跑凝膠的結(jié)果條帶上連Positive control 的條帶都沒(méi)出來(lái)。第一次做的時(shí)候是有的，但第二，三次就沒(méi)有。期間，自己的個(gè)人操作應(yīng)該沒(méi)多大差別�，F(xiàn)懷疑是否因?yàn)檫^(guò)程中使用的 酶 因?yàn)榉磸?fù)凍融而失活。 用的試劑盒是：Takara one step rna pcr kit (amv) 商品編號(hào)DRR024A。保存在-20攝氏度，用的時(shí)候拿出來(lái)，因?yàn)楸容^昂貴，本身又沒(méi)有小包裝，用完了再放回去。 這會(huì)不會(huì)是一個(gè)致命的因素呢？ 大家若是遇到過(guò)這種情況，是這個(gè)問(wèn)題的話，那么該如何避免呢？或者，有什么好的方法建議，有什么經(jīng)驗(yàn)技巧，都很希望大家能指點(diǎn)一二。 另外，實(shí)際操作中，如果我做9個(gè)反應(yīng)管，那么我大概就取10份出來(lái)，先混合好，然后再分裝。那么我混合的時(shí)候是把所有的東西都全混合，還是只混合水，dNTP，氯化鎂，buffer，分裝；而那些引物，RNA抑制劑，各種酶（AMV逆轉(zhuǎn)錄酶，Taq酶）就另外一管一管的加。 急盼高手指點(diǎn)。 |
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2樓2010-08-28 04:07:36
silicare
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3樓2010-08-28 09:44:16
怎么都行
銀蟲 (小有名氣)
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4樓2010-08-28 10:47:28
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