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lysogen金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】試驗失敗了，請高手指點 已有3人參與
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做分子試驗時，跑凝膠的結(jié)果條帶上連Positive control 的條帶都沒出來。第一次做的時候是有的，但第二，三次就沒有。期間，自己的個人操作應(yīng)該沒多大差別�，F(xiàn)懷疑是否因為過程中使用的 酶 因為反復(fù)凍融而失活。 用的試劑盒是：Takara one step rna pcr kit (amv) 商品編號DRR024A。保存在-20攝氏度，用的時候拿出來，因為比較昂貴，本身又沒有小包裝，用完了再放回去。 這會不會是一個致命的因素呢？ 大家若是遇到過這種情況，是這個問題的話，那么該如何避免呢？或者，有什么好的方法建議，有什么經(jīng)驗技巧，都很希望大家能指點一二。 另外，實際操作中，如果我做9個反應(yīng)管，那么我大概就取10份出來，先混合好，然后再分裝。那么我混合的時候是把所有的東西都全混合，還是只混合水，dNTP，氯化鎂，buffer，分裝；而那些引物，RNA抑制劑，各種酶（AMV逆轉(zhuǎn)錄酶，Taq酶）就另外一管一管的加。 急盼高手指點。 |
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銀蟲 (小有名氣)
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silicare
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3樓2010-08-28 09:44:16
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