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喜洋洋1024銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助】能否先在小柱上摸索洗脫條件 再改在大柱上使用 已有13人參與
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| 我現(xiàn)在剛開始提取甾苷類物質(zhì) 因為之前都沒有過過柱子 看碩士論文上一般都是提取十斤左右中藥 再過柱子分離 但是我怕一次過那么多要是中間搞不好把樣品損失了 就太浪費了 所以想先取少量在小柱子上摸條件 再在大柱子上 用 可行否 望指教 |
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babituo
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
karl2100(金幣+1):謝謝指教！ 2010-09-03 01:53:13
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karl2100(金幣+1):謝謝指教！ 2010-09-03 01:53:13
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過大柱是粗分，只要接液時勤換下承接的三角瓶，一般500ml三角瓶接液200ml就換，既沒問題。每接下四瓶就點板查看，板上點一樣的就合瓶旋蒸，勤快些就不會出錯。 分離前先TLC摸好條件，用TLC展開劑的條件走大柱就行。上樣前炒好樣，硅膠（4-5倍樣品量，計算好柱中塔板數(shù)，留出加入流動相后的空間）上柱后先用流動相平衡好，樣品加入后流動相要緩慢加入，前三次沿壁加入流動相剛沒過樣品即可，以后柱中流動相高度在慢慢增高。晚上人走后，記得封柱，流動相高度剛沒過樣品時封柱。 柱子最好不要走空，一走空就有氣泡進入，影響分離。 |
11樓2010-09-02 22:23:33
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