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jia1012428銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】請(qǐng)教一個(gè)提基因組的問(wèn)題 已有3人參與
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| 請(qǐng)問(wèn)大家，我有一個(gè)混菌體系，想做末端限制性酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析，需要提混菌的總基因組，我看試劑盒上的說(shuō)明說(shuō)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌提取方法不一樣，請(qǐng)教分子高手該怎么做，多謝！ |
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sfxt001
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小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
1949stone(金幣+2):謝謝交流 2010-09-15 19:34:16
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1949stone(金幣+2):謝謝交流 2010-09-15 19:34:16
| 這個(gè)我在前面回別人的帖子上面提到過(guò)，陽(yáng)性菌分子操作的一個(gè)重要的需要解決的問(wèn)題就是細(xì)胞裂解的是否充分，革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁非常結(jié)實(shí)，對(duì)于陰性菌好使的SDS堿性裂解液直接用來(lái)裂解陽(yáng)性菌細(xì)胞是不好使的，細(xì)胞裂不掉，你想抽到基因組，當(dāng)然是搞不定的。比如說(shuō)處理金黃色葡萄球菌，在用SDS堿性裂解液之前，就得先用溶葡萄球菌酶處理才行。問(wèn)題是你用的是混合菌，你的菌群里有哪些革蘭氏陽(yáng)性菌你是不知道的，所以可能用物理方法比如超聲破碎先預(yù)處理比較好。 |
2樓2010-09-15 10:38:08
jia1012428
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3樓2010-09-15 19:10:03
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4樓2010-09-15 19:10:42
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5樓2010-09-15 21:50:39
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6樓2010-09-16 20:14:19
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