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jia1012428銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】請(qǐng)教一個(gè)提基因組的問題 已有3人參與
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| 請(qǐng)問大家，我有一個(gè)混菌體系，想做末端限制性酶切片段長度多態(tài)性分析，需要提混菌的總基因組，我看試劑盒上的說明說革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌提取方法不一樣，請(qǐng)教分子高手該怎么做，多謝！ |
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sfxt001
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
1949stone(金幣+2):謝謝交流 2010-09-15 19:34:16
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1949stone(金幣+2):謝謝交流 2010-09-15 19:34:16
| 這個(gè)我在前面回別人的帖子上面提到過，陽性菌分子操作的一個(gè)重要的需要解決的問題就是細(xì)胞裂解的是否充分，革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁非常結(jié)實(shí)，對(duì)于陰性菌好使的SDS堿性裂解液直接用來裂解陽性菌細(xì)胞是不好使的，細(xì)胞裂不掉，你想抽到基因組，當(dāng)然是搞不定的。比如說處理金黃色葡萄球菌，在用SDS堿性裂解液之前，就得先用溶葡萄球菌酶處理才行。問題是你用的是混合菌，你的菌群里有哪些革蘭氏陽性菌你是不知道的，所以可能用物理方法比如超聲破碎先預(yù)處理比較好。 |
2樓2010-09-15 10:38:08
jia1012428
銅蟲 (小有名氣)
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3樓2010-09-15 19:10:03
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4樓2010-09-15 19:10:42
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5樓2010-09-15 21:50:39
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6樓2010-09-16 20:14:19
bitdeng
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