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windbells636金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【專題】MCF-7培養(yǎng)
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我最近培養(yǎng)的MCF-7細胞長的不好啊 1·貼壁率不好啊,沒有像以前一樣是長條三角形的,很多事有點園形的,不用胰蛋白酶消化就能吹下來 2·死亡率較高啊,培養(yǎng)一天后培養(yǎng)基中漂浮的細胞數(shù)就比較多 我用的是1640培養(yǎng)基,10%新生牛血清,40單位/L胰島素 跪求高人指點啊,謝謝了 |
木蟲 (正式寫手)
金蟲 (著名寫手)

鐵桿木蟲 (著名寫手)
鐵桿小蟲
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用DMEM. [ Last edited by 雪山飛狐7233 on 2010-9-17 at 12:48 ] |

木蟲 (正式寫手)
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1640和DMEM都差不多的,我兩種都用過。你復(fù)蘇也一樣的,第一,是否凍存的時候細胞狀態(tài)不好?第二,凍存時間是否過長?凍在哪里?-80°冰箱還是液氮?一般來說凍在液氮里的細胞狀態(tài)和復(fù)蘇前的都差不多,除非是液氮中間用完了,使凍的溫度發(fā)生了改變,第三,如果剛復(fù)蘇挺好, 但過了一段時間不好了,那就要考慮自身問題了,是否血清分裝了?是否時間過長?是否培養(yǎng)基用的時間過長?細胞的背景是不是發(fā)黑?在高背景下觀察背景中有沒有會動的東西? 總之要考慮的因素太多了,一點一點排除 |
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