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mango70803575

銀蟲(chóng) (小有名氣)

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[交流] 【求助/交流】在SDS-PAGE當(dāng)中遇到的一些問(wèn)題

我做的是從真菌發(fā)酵液中篩選活性蛋白，選用SPFF柱，現(xiàn)已分離出幾個(gè)峰，將收集的峰富集蛋白做SDS-PAGE時(shí)，因?yàn)榭既居袔讉€(gè)泳道看不清條帶，于是進(jìn)行銀染，但銀染的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，除了原先考染可見(jiàn)的條帶之外，幾乎每個(gè)泳道在相同的位置都有雜帶
我想問(wèn)的是，所有泳道相同位置都存在的雜帶，是不是因?yàn)槲业姆蛛x不夠徹底，還是可能存在富集過(guò)程中使用溶液的問(wèn)題，或還有其他原因？
希望高手指點(diǎn)！

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【求助/交流】請(qǐng)教，SDS-PAGE的問(wèn)題已經(jīng)有11人回復(fù)

過(guò)去的一切等于零，現(xiàn)在的一切從零開(kāi)始！

1樓 2010-09-17 09:52:37

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liyong1981

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mango70803575(金幣+1): 2010-09-26 08:47:39

冰醋酸多加點(diǎn)~

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9樓2010-09-25 12:00:16

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sqhnsd

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引用回帖:

Originally posted by mango70803575 at 2010-09-17 09:52:37:
我做的是從真菌發(fā)酵液中篩選活性蛋白，選用SPFF柱，現(xiàn)已分離出幾個(gè)峰，將收集的峰富集蛋白做SDS-PAGE時(shí)，因?yàn)榭既居袔讉€(gè)泳道看不清條帶，于是進(jìn)行銀染，但銀染的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，除了原先考染可見(jiàn)的條帶之外，幾乎每個(gè)泳 ...

我沒(méi)有用過(guò)你說(shuō)的SPFF柱，不過(guò)單純憑一個(gè)離子交換柱就想得到比較純的蛋白，可能性不大吧。

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2樓2010-09-17 17:08:18

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mango70803575

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Originally posted by sqhnsd at 2010-09-17 17:08:18:

我沒(méi)有用過(guò)你說(shuō)的SPFF柱，不過(guò)單純憑一個(gè)離子交換柱就想得到比較純的蛋白，可能性不大吧。

這個(gè)可能性確實(shí)不大，但我是想看看活性峰里的蛋白大概在多少分子量

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過(guò)去的一切等于零，現(xiàn)在的一切從零開(kāi)始！

3樓2010-09-20 08:15:10

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sqhnsd

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mango70803575(金幣+1): 2010-09-25 10:40:30

引用回帖:

Originally posted by mango70803575 at 2010-09-20 08:15:10:

這個(gè)可能性確實(shí)不大，但我是想看看活性峰里的蛋白大概在多少分子量

很困難，你沒(méi)有抗體。而且，活性峰的最濃蛋白，不見(jiàn)得是你的目的蛋白

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4樓2010-09-20 08:59:58

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