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angel4219銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助】100金幣求助MTT實驗方案優(yōu)化�。�
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A植物粗提物 B用EP管稱取 C用1mlDMSO溶解 D取1微升溶解液溶于細胞培養(yǎng)液 E用針頭式濾器過濾上述含藥培養(yǎng)母液 F取1.5ml母液加1.5ml新鮮培養(yǎng)液于15ml離心管中混合 G取F中混合培養(yǎng)液1.5ml再加1.5ml新鮮培養(yǎng)液于15ml離心管中混合 H重復f、g的步驟直到配成6個濃度梯度 I消化細胞，加入4ml培養(yǎng)液吹打。吹打均勻（約30次） J細胞計數(shù)（細胞密度40萬/ml） K取一定體積的細胞母液于15ml離心管中 L取新鮮培養(yǎng)液稀釋K中母液至細胞濃度為5萬/ml M 用1ml移液槍繼續(xù)吹打120次左右 N倒出M中培養(yǎng)液于排槍加樣槽 O 用排槍取100微升接種于96孔培養(yǎng)平板 P 培養(yǎng)16小時（細胞約占平板面積的60%） Q 加入H中6個已經(jīng)配好的藥液于96孔平板中 R培養(yǎng)48小時 S 加入5微克/ml的MTT T 放入培養(yǎng)箱中4小時 U吸出孔中液體加入200ul的DMSO V 放入酶標儀中于490nm處檢測 W記錄實驗結(jié)果 我的實驗步驟如上。現(xiàn)在的實驗結(jié)果每次測出來都不盡如人意（因為這個粗提物是在美國的實驗室做過抗腫瘤活性篩選的。）主要是IC50相差幾百倍！求教各位蟲友。對于各位的建議，我將發(fā)金幣于感謝！多謝大家提出寶貴意見！ |
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sassas
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2樓2010-10-09 09:13:36
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