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sun1123moon銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】非變性聚丙烯酰胺電泳 已有8人參與
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我是新手做非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳實(shí)驗(yàn),1)配制分離膠和濃縮膠的濃度是怎樣的? 2)我要做凝膠的正交實(shí)驗(yàn),選出同工酶酶帶最好的分離膠和濃縮膠濃度,應(yīng)該怎樣設(shè)計(jì),各成分的體積需要多少? 謝謝! |
木蟲 (正式寫手)
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溫度不是太大的問題,16-20是比較正常的室溫 關(guān)鍵是要讓聚合過程控制在40min-1h之內(nèi),太快了膠凝的不勻,太慢了浪費(fèi)時(shí)間 濃縮膠濃度基本不影響實(shí)驗(yàn)的,5%左右就行 至于分離膠,非變性膠目的蛋白的遷移性質(zhì)不太好確定,可以先大概從一個(gè)常用的濃度開始,比如12%或者15%,跑幾次,看看情況再?zèng)Q定提高或降低濃度,并且要確定相應(yīng)的電泳條件(電壓、時(shí)間),畢竟這三者是相互關(guān)聯(lián)的 |
銀蟲 (小有名氣)

金蟲 (正式寫手)
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