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liyong1981
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[交流]
【求助/交流】求助-苯酚氯仿純化DNA方法 已有3人參與
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求助-苯酚氯仿純化DNA方法 哪位大仙有啊，我是純化質粒用的，不是提取，謝謝了。貌似是先用苯酚氯仿，接著用氯仿，最后是用3M醋酸鈉，多謝了。 |
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liyong1981(金幣+2): 2010-10-11 16:56:17
amisking(金幣+3):good！ 2010-10-11 19:51:53
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amisking(金幣+3):good！ 2010-10-11 19:51:53
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苯酚溶于氯仿 可以直接買配好的酚氯仿，吸下層有機相使用。 如果要自己配，先吸Tris飽和酚（純化RNA時用水飽和酚），吸下層黃色的（上層是tris緩沖液，起飽和和水封的作用）。和等體積氯仿混勻（異戊醇可加可不加，看心情）。由于苯酚里面有一定的水（tris緩沖液），所以這個混勻的體系是乳濁液，有的實驗室直接就用這個乳濁液，有的實驗室混勻后離心，棄掉上面的水相，用下層有機相（實際上就是把苯酚從水里萃取到氯仿里）。 兩種方法都可以，畢竟那點水不起什么作用，無非是最后吸取的水相體積會變大一點 |
8樓2010-10-11 16:35:43
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