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liyong1981
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[交流]
【求助/交流】求助-苯酚氯仿純化DNA方法 已有3人參與
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求助-苯酚氯仿純化DNA方法 哪位大仙有啊,我是純化質(zhì)粒用的,不是提取,謝謝了。貌似是先用苯酚氯仿,接著用氯仿,最后是用3M醋酸鈉,多謝了。 |
木蟲 (正式寫手)

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木蟲 (正式寫手)
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苯酚溶于氯仿 可以直接買配好的酚氯仿,吸下層有機(jī)相使用。 如果要自己配,先吸Tris飽和酚(純化RNA時用水飽和酚),吸下層黃色的(上層是tris緩沖液,起飽和和水封的作用)。和等體積氯仿混勻(異戊醇可加可不加,看心情)。由于苯酚里面有一定的水(tris緩沖液),所以這個混勻的體系是乳濁液,有的實驗室直接就用這個乳濁液,有的實驗室混勻后離心,棄掉上面的水相,用下層有機(jī)相(實際上就是把苯酚從水里萃取到氯仿里)。 兩種方法都可以,畢竟那點水不起什么作用,無非是最后吸取的水相體積會變大一點 |
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