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hopebiolqdhb金蟲 (著名寫手)
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【轉(zhuǎn)帖】植物組培中初代培養(yǎng)
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初代培養(yǎng)是接種外植體后最初的幾代培養(yǎng)，其目的是獲得無菌材料和無性繁殖系。初代培養(yǎng)建立的無性繁殖系包括莖梢、芽叢、胚狀體和原球莖等。 1、培養(yǎng)基的選擇 初代培養(yǎng)基時常用誘導(dǎo)或分化培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素的配比和濃度最為重要，如刺激腋芽或頂芽生長時，細胞分裂素的適宜濃度是0.5~1.0mg/L，生長素的濃度水平為0.01~0.1 mg/L；誘導(dǎo)不定芽時，需要較高的細胞分裂素；誘導(dǎo)愈傷組織形成，增加生長素的濃度并補充一定濃度的細胞分裂素是十分必要的。 2、外植體的生長與分化 （1）頂芽和腋芽發(fā)育 以植物莖尖、頂芽、側(cè)芽或帶有芽的莖段作為外植體，在外源的細胞分裂素作用下，頂芽或休眠側(cè)芽萌發(fā)生長，伸長形成多節(jié)莖段的莖梢，或形成一個微型多枝多芽的小灌木叢狀結(jié)構(gòu)。該發(fā)育方式具有萌發(fā)時間段，成苗快，不經(jīng)過愈傷組織再生，能使無性系后代保持原品種特性等特點。 （2）不定芽發(fā)育 在初代培養(yǎng)中一些植物的葉片、不帶腋芽莖段先脫分化形成愈傷組織，再從愈傷組織塊上分化形成不定芽；而有些植物，如球根秋海棠、非洲紫羅蘭、百合、貝母等，不定芽可直接從外植體表面受傷的或沒有受傷的部位直接分化出來。 植物的莖段、葉、葉柄、根、花莖、萼片、花瓣等器官都可以作為外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽。但由不定芽產(chǎn)生的苗具有更大的性狀變異幾率，觀賞植物中有不少遺傳學(xué)嵌合體，如金邊虎尾蘭、花葉玉簪、金邊巴西鐵樹等，這些鑲嵌色彩的葉子和一些帶金銀邊的植物，在通過不定芽途徑時，再生植株便失去這些富有觀賞價值的特征。 (3)原球莖發(fā)育 在蘭花和部分球根植物的種子萌發(fā)初期并不出現(xiàn)胚根，只是胚逐漸膨大，以后種皮的一端破裂，形成的小圓錐狀脹大的胚稱為原球莖。在植物組織培養(yǎng)中，從蘭花的頂芽、側(cè)芽組織中或從種子中萌發(fā)的植株器官，都能誘導(dǎo)這樣的原球莖。往往在一個芽的周圍能產(chǎn)生幾個到幾十個原球莖，培養(yǎng)一段時間后，原球莖可發(fā)育成完整的再生植物。 （4）胚狀體發(fā)育 胚狀體是由體細胞形成的、類似于生殖細胞形成合子胚發(fā)育過程的胚胎。胚狀體可以從愈傷組織表面，也可由外植體表面已分化的細胞或從懸浮培養(yǎng)的細胞中產(chǎn)生。 胚狀體發(fā)育出的再生小植株與腋芽苗或不定芽苗有顯著差異：一是胚狀體在形成的最初階段，多來自單個細胞或多個細胞團，很早就具有明顯的根端于苗端的兩極分化，極幼小時就是一個根芽齊全的微型結(jié)構(gòu)，通常不需要誘導(dǎo)生根階段；二是由胚狀體發(fā)育成的植株成的植株與周圍的愈傷組織或母體組織塊之間，幾乎沒有什么結(jié)構(gòu)性的聯(lián)系，小植株是獨立形成的，易于與其他部分分離，胚狀體小植株通過振搖或鑷子、解剖針等輕拔就可彼此分開。 而由腋芽或不定芽發(fā)育來的小植物，它們最初由分生細胞團形成單極性的生長點發(fā)育而來，隨后再轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上形成根，才能形成完整的小植株。通常它們與母體組織塊或愈傷組織之間有著較緊密的連接，包括一些維管束、皮層和表皮組織等，因而不易分離，在轉(zhuǎn)移時往往用刀切才能分開。 |
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