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amethyst967木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助/交流】求助：轉(zhuǎn)基因植株鑒定的一些問題 已有2人參與
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我做轉(zhuǎn)基因大豆的，接了一個(gè)師姐的材料，現(xiàn)在是T4代，老板讓我驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因植株，并且做基因表達(dá)分析。我要做southern和RT，這是老板指定的，為了southern可以少做一些，我想先通過PCR來篩出轉(zhuǎn)基因植株，可是我手里只有師姐的論文，沒有陽性質(zhì)粒。 我用了師姐論文里的引物、體系、程序，所有的都按她的PCR條件，但是得不到和她一樣的結(jié)果。 現(xiàn)在我不知道該怎么做了，她所轉(zhuǎn)進(jìn)去的基因是大豆的一個(gè)內(nèi)源基因，她截了三段，分別是928bp、435bp和2380bp，她用928bp和435bp的片段構(gòu)了干擾載體，2380bp的片段構(gòu)了過表達(dá)載體。 師姐論文里沒有序列，只有登錄號(hào)和引物，我按照她的引物找出來的序列與她標(biāo)注的數(shù)字差十幾bp，我就隔開這十幾bp去重新設(shè)計(jì)引物，但是還是PCR不出結(jié)果，請(qǐng)各位高手指點(diǎn)一下，謝謝~ |
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3樓2010-10-23 17:03:23
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