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amethyst967木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助/交流】求助:轉基因植株鑒定的一些問題 已有2人參與
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我做轉基因大豆的,接了一個師姐的材料,現在是T4代,老板讓我驗證轉基因植株,并且做基因表達分析。我要做southern和RT,這是老板指定的,為了southern可以少做一些,我想先通過PCR來篩出轉基因植株,可是我手里只有師姐的論文,沒有陽性質粒。 我用了師姐論文里的引物、體系、程序,所有的都按她的PCR條件,但是得不到和她一樣的結果。 現在我不知道該怎么做了,她所轉進去的基因是大豆的一個內源基因,她截了三段,分別是928bp、435bp和2380bp,她用928bp和435bp的片段構了干擾載體,2380bp的片段構了過表達載體。 師姐論文里沒有序列,只有登錄號和引物,我按照她的引物找出來的序列與她標注的數字差十幾bp,我就隔開這十幾bp去重新設計引物,但是還是PCR不出結果,請各位高手指點一下,謝謝~ |

木蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)

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