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[交流]
【求助/交流】PCR問題求解，2段基因連接
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做PCR，用1上1下引物P出來一個(gè)基因，250bp，然后用2上2下p出另外一個(gè)基因，2500bp�，F(xiàn)在我如何把這2個(gè)基因連接起來為模板繼續(xù)p？ 我的做法是把1下和2上這兩個(gè)引物設(shè)計(jì)成有12個(gè)bp的互補(bǔ)，讓他們p出來的2個(gè)基因可以有12個(gè)堿基的互補(bǔ)，然后再用1上和2下對這個(gè)互補(bǔ)的基因進(jìn)行PCR，但是具體該如何設(shè)計(jì)呢？P一次，發(fā)現(xiàn)是引物2聚體的。。變性和退火溫度是如何依據(jù)的？ 請高手指點(diǎn)。。。 |
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