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[交流]
【求助/交流】PCR問題求解,2段基因連接
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做PCR,用1上1下引物P出來一個基因,250bp,然后用2上2下p出另外一個基因,2500bp。現(xiàn)在我如何把這2個基因連接起來為模板繼續(xù)p? 我的做法是把1下和2上這兩個引物設(shè)計成有12個bp的互補,讓他們p出來的2個基因可以有12個堿基的互補,然后再用1上和2下對這個互補的基因進行PCR,但是具體該如何設(shè)計呢?P一次,發(fā)現(xiàn)是引物2聚體的。。變性和退火溫度是如何依據(jù)的? 請高手指點。。。 |
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