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gaogaoxing

鐵桿木蟲 (正式寫手)

[交流] 【求助/交流】BSA法測蛋白質濃度的原理和方法 已有10人參與

求助BSA法測蛋白質濃度的原理和方法
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xhjggl

木蟲 (正式寫手)

上海生工有 021-37772436

★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+2):感謝提供 2010-11-19 13:37:26
Bradford Protein Assay Kit
Bradford 蛋白質定量檢測試劑盒       
產(chǎn)品說明:Bradford試劑蛋白定量是一種快速,即用型的總量蛋白光學定量方法,在酸性條件下,考馬斯亮蘭G-250染料與蛋白質疏水區(qū)結合,導致最大吸收峰由465 nm 變?yōu)?95 nm,同時顏色也由棕色變?yōu)樗{色,該藍色化合物顏色的深淺與蛋白質濃度的高低成正比關系。將蛋白質樣品或稀釋的BSA 與Bradford試劑混合,測量在595 nm處的吸收值,在建立由一系列稀釋的BSA建立的標準曲線的情況下,蛋白質的濃度可以根據(jù)標準曲線而確定。
產(chǎn)品特點:
1、 檢測速度快,10-20個樣品只需不足10分鐘即可完成;
2、 靈敏度高,最小檢測蛋白量達到0.2微克,待測樣品體積為1-20ul;
3、 在10-150微克/毫升濃度范圍內(nèi)有較好的線性關系;
4、與還原性糖和還原性巰基試劑兼容;
5、可以采用分光光度法或酶標板法對蛋白進行定量。
編號        包裝        價格        產(chǎn)地
SK3031        1000 Assays        150        生工
SK3033        1000Assays +10Microplates        230        生工

Modified Bradford Protein Assay Kit
改良型Bradford蛋白濃度測定試劑盒       
產(chǎn)品說明:在使用常規(guī)Bradford試劑進行蛋白定量時,考馬斯亮蘭G-250染料分子之間,以及G-250與蛋白質復合物之間會發(fā)生聚集,隨著時間的延長,產(chǎn)生可見的易沉降的顆粒,使得在595nm處測定的吸光度值A595時,蛋白質濃度的定量偏低。針對此種情況,本試劑盒通過添加特殊的試劑,使得考馬斯亮蘭G-250染料分子之間,以及G-250與蛋白質復合物在30分鐘內(nèi)不容易發(fā)生沉降,從而提高了測量結果的準確性。使得大量樣品的定量變的從容不迫。
產(chǎn)品特點:
1.在30分鐘內(nèi),G-250染料分子和G-250與蛋白質復合物不容易發(fā)生沉淀;
2.無論是分光光度法或酶標板法都有大小兩種定量范圍的操作方法;
3.還能夠適應疏水的膜或粘蛋白的定量;
4.比較合適于從容不迫地進行大量樣品的定量;
5.與常規(guī)的Bradford法相比,線形關系更佳,保證了結果的準確性。
編號        包裝        價格        產(chǎn)地
SK3041        1000 Assays        360        生工

BCA Protein Assay Kit
BCA蛋白質定量檢測試劑盒       
產(chǎn)品說明:BCA法是理想的蛋白質定量方法,在堿性環(huán)境下蛋白質分子中肽鍵結構與Cu2+絡合并將Cu2+還原成Cu1+。BCA特異地與Cu1結合形成穩(wěn)定的紫藍色復合物,在562 nM處有最大的光吸收值并與蛋白質濃度成正比,顏色的深淺與蛋白質的含量成正比,可以根據(jù)吸收值測定蛋白質濃度。該測定方法靈敏度高,操作簡單,試劑及其形成的顏色復合物穩(wěn)定性俱佳,并且受干擾物質去垢劑等影響小。
產(chǎn)品特點:
1.準確靈敏,線性范圍廣,BCA試劑的蛋白質測定范圍是25-500μg/ml;
2.快速:45分鐘內(nèi)完成測定,比經(jīng)典的Lowry法快4倍而且更加方便;
3.不受樣品中離子型和非離子型去污劑影響;
4.檢測不同蛋白質分子的變異系數(shù)遠小于考馬氏亮藍,可以酶標板法或分光光度計法測定蛋白質濃度。
編號        包裝        價格        產(chǎn)地
SK3021        500 Assays        450        生工

Modified BCA Protein Assay Kit
改良型BCA蛋白濃度測定試劑盒       
產(chǎn)品說明:在堿性環(huán)境中,蛋白質和Cu2+離子結合并將其還原成Cu+離子。BCA與Cu+離子結合形成穩(wěn)定的紫藍色復合物,在562nm處有最大光吸收并與蛋白質濃度成線性關系,據(jù)此可測定蛋白質的濃度。與Lowery法相比,BCA法最大的優(yōu)點就是不受去垢劑的影響。但樣品中若存在還原劑,同樣可以將Cu2+離子還原成Cu+離子,從而提高光吸收值。本試劑盒中的試劑C可以有效地降低蛋白質抽提樣品中殘留的還原劑對蛋白質濃度檢測的干擾。當樣品中的DTT濃度≤5mM或β-巰基乙醇濃度≤10mM時,蛋白質濃度的測定不會受影響。
產(chǎn)品特點:
1.在樣品中的DTT濃度≤5mM或β-巰基乙醇濃度≤10mM時,光吸收值不受影響;
2.可以采用酶標板法或分光光度法進行蛋白質定量,定量范圍為25-1000ug/ml;
3.需要的樣品體積5-25ul;
4.不受樣品中低濃度的離子型和非離子型去污劑影響。
編號        包裝        價格        產(chǎn)地
SK3051        500 Assays        500        生工

Micro BCA Protein Assay Kit
BCA法微量蛋白質濃度測定試劑盒       
產(chǎn)品說明:BCA法是理想的蛋白質定量方法,在堿性環(huán)境下蛋白質與Cu2+絡合并將Cu2+還原成Cu1+。BCA與Cu1+結合形成穩(wěn)定的紫藍色復合物,在562 nM處有最大的光吸收值并與蛋白質濃度成正比,據(jù)此可測定蛋白質濃度。該測定方法靈敏度高,操作簡單,試劑及其形成的顏色復合物穩(wěn)定性俱佳,并且受干擾物質去垢劑等影響小。本試劑盒適用于微量蛋白質濃度的測定。
產(chǎn)品特點:
1.適用于濃度比較稀的蛋白質樣品的定量;
2.定量范圍:分光光度法0.5-20μg/ml;酶標板法2-40μg/ml;
3.與離子型或非離子型去污試劑兼容;
4.檢測不同蛋白質分子的變異系數(shù)遠小于考馬氏亮藍。
編號        包裝        價格        產(chǎn)地
SK3061        1250 Assays        360        生工

Lowry Protein Assay Kit
福林酚蛋白濃度測定試劑盒       
產(chǎn)品說明: 在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物。此絡合物將磷鉬酸-磷鎢酸試劑(Folin 試劑)還原,產(chǎn)生深藍色(磷鉬藍和磷鎢藍混合物),這種深藍色的復合物在745-750nm處有最大吸收峰,顏色深淺與蛋白質含量成正比。此法操作簡便,靈敏度比雙縮脲法高100 倍。
產(chǎn)品特點:
1.不同蛋白質分子之間的變異系數(shù)教小;
2.在40分鐘內(nèi)可以完成蛋白質定量過程;
3.有酶標板法和分光光度法兩種定量程序
4.定量范圍為5-100ul/ML蛋白質。
編號        包裝        價格        產(chǎn)地
SK4031        1000 Assays        150        生工
SK4033        1000 Assays  +10Microplates        230        生工

Stable Lowry Protein Assay Kit   
穩(wěn)定型Lowry法蛋白濃度測定試劑盒       
產(chǎn)品說明: 堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物。此絡合物將磷鉬酸-磷鎢酸試劑(Folin 試劑)還原,產(chǎn)生深藍色(磷鉬藍和磷鎢藍混合物),顏色深淺與蛋白質含量成正比。此法靈敏度比雙縮脲法高100 倍,定量范圍為5-100μg/ml蛋白質。經(jīng)典的Lowry法的主要缺點是由Reagent A和B按照一定比例配置成的堿性銅試劑(Reagent C)不穩(wěn)定,需要當天配制,經(jīng)典的Lowry法產(chǎn)生的顏色穩(wěn)定性也不高,在反應20-120min內(nèi)變化9.2%。本試劑盒采用一種改進的即用型穩(wěn)定的堿性銅試劑代替經(jīng)典Lowry法的Reagent A;B;C,使得實驗操作更加的簡單便捷,反應產(chǎn)生的藍色復合物能夠穩(wěn)定存在至少2小時。而且該穩(wěn)定型堿性銅試劑在4度,避光的條件下可穩(wěn)定保存至少6個月以上,實驗制得的標準曲線與經(jīng)典方法基本吻合。用酶標板使用1000次或分光光度法100次。
產(chǎn)品特點:
1.即用型而且穩(wěn)定的堿性銅試劑,使用更加方便;
2.有離心管法和酶標板法兩種定量方法;
3.蛋白質濃度的線性范圍在5-100μg/ml;
4.高的靈敏性保證了低蛋白質濃度樣品的精確定量。
編號        包裝        價格        產(chǎn)地
SK4051        1000 Assays        260        生工

Modified Lowry Protein Assay Kit   
改良型Lowry法蛋白濃度測定試劑盒       
產(chǎn)品說明: 在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物。此絡合物將磷鉬酸-磷鎢酸試劑(Folin 試劑)還原,產(chǎn)生深藍色(磷鉬藍和磷鎢藍混合物),顏色深淺與蛋白質含量成正比。此法操作簡便,靈敏度比雙縮脲法高100 倍,定量范圍為5-100μg/ml蛋白質。通過特殊的沉淀試劑可以完全去除蛋白質樣品中的大部分干擾物質,而蛋白質的損失幾乎為零.保證了結果的準確性和提高了定量的靈敏度。
產(chǎn)品特點:
1.特殊的沉淀試劑去除蛋白質樣品中干擾物質,比常規(guī)lowry有更好的線性關系,結果更準確;
2.不同蛋白質分子之間的變異系數(shù)教小;
3.有酶標板法和分光光度法兩種定量程序;
4.定量范圍為5-100μg/ml蛋白質。
編號        包裝        價格        產(chǎn)地
SK4041        1000 Assays        180        生工


非干擾型蛋白濃度測定試劑盒   
Non-Interference Protein Assay Kit       
產(chǎn)品說明: 非干擾型蛋白質定量試劑盒是排除決大多數(shù)實驗室常規(guī)試劑的干擾的光學定量方法,它可以去除離子,非離子,兩性去污試劑,還原試劑,螯合試劑,Tris ,糖,鹽酸胍等變性試劑,對于在Laemmeli buffer等蛋白質上樣緩沖液,2D sample extraction buffer,高濃度的β-mercaptoethanol (<15%) ,脂質體中的蛋白質也可以定量,蛋白質量在0.5-50µg 之間有良好的線性關系,需要的樣品體積在1-50µl ,特殊的沉淀試劑可以去除掉絕大多數(shù)干擾物質,被沉淀的蛋白質與含有銅的堿性物質相混合,未與蛋白質相結合銅在被還原為一價后與特定的生色試劑反應,產(chǎn)生特定的480nm吸收波長,所以隨著蛋白質的濃度增加,,未與蛋白質結合銅相應減少,這樣特定的吸收波長的吸收值與溶液中的蛋白質濃度成反比,這種蛋白質定量方法不受氨基酸副鏈和蛋白質的種類的影響,本試劑盒可以做250次微量定量。
產(chǎn)品特點:
1.整個實驗過程大約只需要40分鐘左右;
2.定量過程不受到非蛋白的去污試劑,還原試劑,螯合試劑,Tris ,糖,變性試劑,化學藥品,抗生素等的影響;
3.定量范圍在0.5-50µg,只需要1-50ul的樣品;
4.比較適合于對2D電泳用的細胞或組織裂解液所提取的蛋白樣品直接進行定量。
編號        包裝        價格        產(chǎn)地
SK3071        250 Assays        500        生工
17樓2010-11-18 21:54:38
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lywang2008

至尊木蟲 (知名作家)

優(yōu)秀版主優(yōu)秀版主

★ ★
gaogaoxing(金幣+1):謝謝參與
dhd997(金幣+1):鼓勵交流。 2010-11-11 10:17:50
將已知濃度的標準蛋白BSA和你經(jīng)常使用的標準ladder,以及你要定量的蛋白放在一個gel上跑膠,對比它們的條帶,然后計算出目標蛋白的含量。
4樓2010-11-11 06:14:49
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普通回帖

tianhuijuan

金蟲 (小有名氣)


小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
gaogaoxing(金幣+1):多謝! 2010-11-08 20:51:32
將未知蛋白條帶與一些列濃度梯度的標準蛋白BSA的條帶對比,粗略定量。
2樓2010-11-08 12:55:57
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gaogaoxing

鐵桿木蟲 (正式寫手)

沒有別的人回復!自己頂了。
3樓2010-11-10 22:45:46
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henkally

禁蟲 (著名寫手)

★ ★
gaogaoxing(金幣+1):謝謝參與
dhd997(金幣+1):鼓勵交流。 2010-11-11 10:17:58
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5樓2010-11-11 09:58:37
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gaogaoxing

鐵桿木蟲 (正式寫手)

引用回帖:
Originally posted by henkally at 2010-11-11 09:58:37:
樓上說得不對,LZ去碧云天下個BCA測蛋白濃度試劑盒的說明書,里面原理講得很清楚

多謝啦!
6樓2010-11-11 13:33:23
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2009227004

金蟲 (正式寫手)

★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
silicare(金幣+1):謝謝分享 2010-11-11 17:12:42
我做的是用lory法,利用一定濃度范圍內(nèi)的五六個濃度的BSA測量其吸光值,作出一條標準曲線,然后將將目的蛋白的吸光值(如果太高了可以稀釋下)調到這個曲線范圍上,這樣就可以得出該蛋白的濃度。!
當別人都在假裝正經(jīng)的時候,我就假裝不正經(jīng)。
7樓2010-11-11 13:59:22
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jhu132llh

榮譽版主 (知名作家)

大洪

好像有人問過,站內(nèi)搜索一下
青春的歲月,我們身不由己,只因這胸中燃燒的夢想!
8樓2010-11-11 15:59:11
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匿名

用戶注銷 (小有名氣)

★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
silicare(金幣+1):謝謝參與 2010-11-12 12:22:23
本帖僅樓主可見
9樓2010-11-12 04:42:35
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herenren

禁蟲 (著名寫手)

★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
silicare(金幣+1):大家都是紫外,建議你多來小木蟲學習學習 2010-11-12 12:22:48
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10樓2010-11-12 11:44:24
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