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quinn鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】離子交換層析怎么選擇pH? 已有3人參與
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我在做蛋白質(zhì)純化，用的是DEAE-A50，請(qǐng)教各位，如何選擇緩沖液pH��？照書上說的用試管做了不同pH的預(yù)實(shí)驗(yàn)，從3.6到6.0可是結(jié)果都差不多，酶都能掛到膠上，用鹽也能洗下來，并且除了6.0，其它pH的上清，也就是沒有掛到膠上的還有大部分蛋白，可用考馬斯亮藍(lán)測出來，6.0上清幾乎沒有蛋白，也就是全掛到膠上了。 所以我選了5.4試一下，發(fā)現(xiàn)結(jié)果和預(yù)實(shí)驗(yàn)很不一樣，用緩沖液洗的時(shí)候根本沒有蛋白下來，用鹽洗又有好多連峰，分不開，然后我又試了一下4.0，結(jié)果根本分不開，梯度洗得時(shí)候就一個(gè)峰，不過峰很漂亮  。親們，給點(diǎn)意見吧！ |
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quinn
鐵蟲 (初入文壇)
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