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[交流]
【求助/交流】離子交換層析怎么選擇pH? 已有3人參與
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我在做蛋白質(zhì)純化，用的是DEAE-A50，請教各位，如何選擇緩沖液pH�。空諘险f的用試管做了不同pH的預實驗，從3.6到6.0可是結(jié)果都差不多，酶都能掛到膠上，用鹽也能洗下來，并且除了6.0，其它pH的上清，也就是沒有掛到膠上的還有大部分蛋白，可用考馬斯亮藍測出來，6.0上清幾乎沒有蛋白，也就是全掛到膠上了。 所以我選了5.4試一下，發(fā)現(xiàn)結(jié)果和預實驗很不一樣，用緩沖液洗的時候根本沒有蛋白下來，用鹽洗又有好多連峰，分不開，然后我又試了一下4.0，結(jié)果根本分不開，梯度洗得時候就一個峰，不過峰很漂亮  。親們，給點意見吧！ |
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4樓2010-11-15 22:58:59
2樓2010-11-15 22:34:43
3樓2010-11-15 22:48:36
5樓2011-10-15 13:26:33
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