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[交流]
【求助/交流】求如何用96孔板做抗菌實驗及數(shù)據(jù)處理問題
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求助各位大俠如何用96孔板做抗菌實驗?所得數(shù)據(jù)如何處理? 本人做法: 1,將0.5濁度的菌懸液,經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基1∶1000稀釋后,向每孔中加100μl。 2,將倍比稀釋后不同濃度的抗菌藥物溶液分別加到滅菌的孔板中,第3至第10孔加藥液,每孔100μl,其余各列加入相同體積的液體培養(yǎng)基,作為生長對照。酶標(biāo)儀讀數(shù)。 3,過夜培養(yǎng),酶標(biāo)儀讀數(shù)。 現(xiàn)在不知道數(shù)據(jù)怎么處理,也不知道做法是否正確? 請各位大俠賜教。 本人化工專業(yè),對生物一竅不通,求助了,謝謝各位。 |
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鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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標(biāo)準(zhǔn)差及方差的數(shù)值代表什么意思? 加入材料為金黃色。經(jīng)過滅菌的液體培養(yǎng)基稀釋后不同濃度的材料顏色不同,吸光度不同,差別較大。 過夜培養(yǎng)后,每列的吸光度差別變小。 左邊六列數(shù)據(jù)如下: (一)加入菌懸液、材料測定吸光度(原始數(shù)據(jù)): 1菌懸液 2菌懸液 3材料原液 4稀釋2倍 5稀釋4倍 6稀釋8倍 A 0.298 0.296 0.574 0.462 0.396 0.372 B 0.307 0.295 0.714 0.564 0.503 0.436 C 0.310 0.309 0.542 0.528 0.443 0.413 D 0.301 0.304 0.654 0.559 0.498 0.453 E 0.298 0.296 0.574 0.462 0.396 0.372 F 0.307 0.295 0.714 0.564 0.503 0.436 G 0.310 0.309 0.542 0.528 0.443 0.413 H 0.301 0.304 0.654 0.559 0.498 0.453 (二)過夜培養(yǎng)之后測定吸光度(十二小時): 1菌懸液 2菌懸液 3材料原液 4稀釋2倍 5稀釋4倍 6稀釋8倍 A 0.987 0.815 1.064 0.938 0.806 0.738 B 0.984 1.001 1.071 0.939 0.759 0.712 C 1.014 1.035 1.010 0.946 0.828 0.751 D 1.003 1.058 1.129 0.964 0.828 0.750 E 0.991 0.812 1.073 0.947 0.809 0.736 F 0.983 1.008 1.050 0.945 0.775 0.715 G 1.013 1.040 1.019 0.965 0.836 0.759 培養(yǎng)18小時、24小時后分別測定吸光度。 請教大俠,我怎么通過上面的數(shù)據(jù)求出抗菌率? |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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材料就算是均勻的液體,也有可能影響吸光度。比濁法一般在OD600那里做吧 你可以看到,在初始時間點,加了材料的原液和稀釋液之后,吸光度上升了接近50%,就說明這個材料以及稀釋液會對吸光度有很大的影響了。而且不同的稀釋倍數(shù),對于吸光度的影響還不一致,這就很難通過扣除的方法來做。除非你用雙波長來矯正,不知道能不能有什么改善。 大腸桿菌離心的話,可以試試8000*g~10000*g,棄包含材料的培養(yǎng)基,然后再用等量的培養(yǎng)基重懸均勻去測吸光度 有那種專門的板式離心機(jī)的 沒有的話就辛苦你一個孔一個孔吸出來做了……………… |
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