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hyw1989960

木蟲 (正式寫手)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
煮完以后,等冷卻到60度(不燙手)時(shí)候加,加完以后倒膠,
7樓2010-11-26 14:36:01
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普通回帖

小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
wickhamhan(金幣+1): 2010-11-26 12:54:46
都可以的,看你習(xí)慣了,實(shí)驗(yàn)室是制膠時(shí)加,
2樓2010-11-26 12:53:28
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feng__

金蟲 (著名寫手)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
我們都是配膠的時(shí)候加!

溶好后冷卻到不燙手,加入EB,混勻,倒膠!
3樓2010-11-26 13:12:14
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墨香若水

木蟲 (著名寫手)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
加在膠里面
4樓2010-11-26 13:12:54
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lyfei999

金蟲 (正式寫手)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
冷卻后加
5樓2010-11-26 14:18:08
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jykjt

木蟲 (正式寫手)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
制膠時(shí)加
6樓2010-11-26 14:29:53
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一碗水端平

木蟲 (職業(yè)作家)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
直接加到凝膠中
8樓2010-11-26 15:09:53
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kevinxin

禁蟲 (小有名氣)


wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
本帖內(nèi)容被屏蔽

9樓2010-11-26 15:19:02
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★ ★ ★
wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
1949stone(金幣+2):正解 2010-11-26 15:43:26
是的
等膠冷卻到大約60度加EB搖勻就行了
注意溫度哦
大高了,對EB不好
太低了,膠就開始凝了,EB可能搖不勻的
10樓2010-11-26 15:31:18
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wsmcc

金蟲 (小有名氣)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
都可以的。提前加進(jìn)去的話效果比較好,如果是驗(yàn)證之類的,跑完電泳跑膠也挺好的,雖然效果不如直接加到膠里好,但是我覺得更安全些。畢竟EB加熱會分解的。
11樓2010-11-26 15:37:54
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★ ★ ★ ★
wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
scelab(金幣+3):歡迎多來交流!:tiger06: 2010-11-26 23:24:20
引用回帖:
Originally posted by wickhamhan at 2010-11-26 12:51:00:
大家做瓊脂糖凝膠電泳時(shí),是EB加入到工作液中,還是跑完電泳再在EB中染色?哪種效果好?

現(xiàn)在很多實(shí)驗(yàn)室基本上都是將EB或者goldview加到膠里,跑完電泳甚至在可見光下也可以看到條帶,方便。
但以前都是先跑膠,然后在EB溶液里染色,這樣既減少了污染,還具有較高的分辨率,但是操作比較繁瑣。

現(xiàn)在我們實(shí)驗(yàn)室對敏感性比較高的PFGE還是用EB來染色,普通的電泳是將Goldview直接加到膠里。
12樓2010-11-26 16:51:53
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zgb1982

木蟲 (正式寫手)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
LS說的是,之前實(shí)驗(yàn)室就是跑膠的地方為非隔離區(qū),有塊隔離區(qū)用來跑完后用EB溶液浸泡15分鐘左右,照相,F(xiàn)在用一種花青素類的東西。是和LOADINGBUFFER 一起加的跑的。
13樓2010-11-26 17:08:15
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wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
都可以

DNA電泳染色可以分為  點(diǎn)染,膠染,泡染,不懂就百度一下,這是基本常識
14樓2010-11-26 17:31:12
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wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
一般就是配膠時(shí)添加的,不過用EB時(shí)可要注意啊~我們實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)在用goldview,低毒!
15樓2010-11-26 17:50:17
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skkyy88888

銅蟲 (著名寫手)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
可以跑完電泳染,也可以在倒膠的時(shí)候加。
16樓2010-11-26 17:52:12
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lhwei1987

鐵桿木蟲 (正式寫手)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
我們是跑完膠染色
17樓2010-11-26 19:48:47
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dy_414

木蟲 (正式寫手)


★ ★ ★ ★
wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
scelab(金幣+3):有意思~ 2010-11-26 23:25:14
溶膠的玻璃瓶在戴著乳膠手套和PE手套的手背上可以停留7秒(皮糙肉厚的男生)或5秒(細(xì)皮嫩肉的女生)以上,就是默認(rèn)<60℃,這時(shí)候可以加EB了
18樓2010-11-26 22:10:15
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ccz3099

金蟲 (正式寫手)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
加在膠里面
19樓2010-11-26 23:11:45
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云橫秦嶺

鐵桿木蟲 (正式寫手)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
跑完膠,再加染色,污染少
20樓2010-11-26 23:31:11
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玉米蟲

銀蟲 (小有名氣)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
制膠過程中加,冷卻到不是很燙手的時(shí)候加。加早了EB要揮發(fā)出來
21樓2010-11-26 23:39:12
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tigertang

木蟲 (著名寫手)


★ ★
wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
dhd997(金幣+1):鼓勵交流 2010-11-27 08:41:30
經(jīng)典的方法是跑完膠后,用EB染膠
通常的做法就是制膠時(shí),在倒膠前加到膠里或直接加到電泳液里

經(jīng)典方法的好處是實(shí)驗(yàn)室比較好控制EB的污染,但對于高濃度的膠(>2%)效果不好。
23樓2010-11-27 00:50:27
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bigboy123

銅蟲 (小有名氣)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
其實(shí)加那里都管用,只要時(shí)刻記得EB對皮膚有致癌性就可以了。我們以前都有徒手做的,非常佩服!
現(xiàn)在有一種信號更強(qiáng)烈的染料替代物,不過后來聽說也是有點(diǎn)致癌性的。
24樓2010-11-27 11:05:16
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lixiaomin8611

金蟲 (初入文壇)



wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
一般是制膠時(shí)加,感覺這樣效果比較好,不過也要等膠冷卻至無蒸汽,以免EB隨之蒸發(fā)~弄得空氣中有毒就不好了~~
25樓2010-11-27 14:12:40
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wmqouc

金蟲 (著名寫手)



小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
也就是前染和后染了
其實(shí)效果差不多
后染污染的區(qū)域比前染小一些
26樓2010-11-28 15:06:46
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-超越beyond

鐵蟲 (小有名氣)


加到膠里會比較好些

★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
silicare(金幣+1):鼓勵新蟲參與 2010-11-29 12:04:01
配好膠后,稍冷卻后,用槍加一點(diǎn)就行,然后搖勻、倒膠。
注意eb致癌,小心。
27樓2010-11-29 10:42:35
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taotao4108

金蟲 (正式寫手)


還是換掉吧,現(xiàn)在很少有實(shí)驗(yàn)室還用EB了,我們以前都用GelRed,挺不錯的,好用不貴,對人沒有傷害
28樓2010-11-30 12:47:08
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bigbangrex

鐵桿木蟲 (小有名氣)



小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
我們是跑完電泳后再染色的,效果差不多,但是要注意染色時(shí)間要長。
29樓2010-11-30 13:25:52
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clare420

新蟲 (小有名氣)



小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
可以做膠的時(shí)候加在膠里,大概50-60度的時(shí)候加,或者在樣品里加也可以,就是樣品,loading,EB加在一起,再點(diǎn)到膠孔里
30樓2010-11-30 15:54:19
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yixinyuan

木蟲 (正式寫手)



小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖交流
我們都是制膠時(shí)候加入EB的,凝膠冷卻不燙時(shí)候加入搖勻倒入制膠槽。
31樓2010-12-04 19:51:10
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簡單回復(fù)
2010-11-26 23:44   回復(fù)  
wickhamhan(金幣+1):謝謝參與
 
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