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yeshui

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在跑瓊脂糖凝膠電泳的過(guò)程中，那個(gè)loadingbuffer越來(lái)越淺，是怎么回事��？之前上樣的時(shí)候很藍(lán)的，我做的是PCR篩選，然后把產(chǎn)物全加進(jìn)去了

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1樓 2011-10-27 10:32:38

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【答案】應(yīng)助回帖

跑的過(guò)程中彌散了，對(duì)結(jié)果沒(méi)什么影響，只要注意一下不要將自己的條帶跑出去就可以

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山水鳳凰

2樓2011-10-27 11:04:28

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yeshui

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2樓: Originally posted by liukgg at 2011-10-27 11:04:28:
跑的過(guò)程中彌散了，對(duì)結(jié)果沒(méi)什么影響，只要注意一下不要將自己的條帶跑出去就可以

可是跑完連Marker的帶都沒(méi)有了啊，我確定我上了

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3樓2011-10-27 11:47:45

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yeshui(金幣+4): 2011-10-27 15:32:22

有沒(méi)有可能是以下幾個(gè)原因：
1.DNA的上樣量不夠。
2.DNA降解。
3.DNA走出凝膠。
可以加大DNA的量；避免核酸酶污染；縮短電泳時(shí)間，降低電壓，增大凝膠濃度。

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4樓2011-10-27 12:01:26

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4樓: Originally posted by 浩然103 at 2011-10-27 12:01:26:
有沒(méi)有可能是以下幾個(gè)原因：
1.DNA的上樣量不夠。
2.DNA降解。
3.DNA走出凝膠。
可以加大DNA的量；避免核酸酶污染；縮短電泳時(shí)間，降低電壓，增大凝膠濃度。

我把所有的PCR產(chǎn)物都加進(jìn)去了啊，可是Marker也降解了嗎？?jī)蓧K膠一塊跑的，另一塊沒(méi)事啊，奇了怪了

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5樓2011-10-27 15:28:39

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5樓: Originally posted by yeshui at 2011-10-27 15:28:39:
我把所有的PCR產(chǎn)物都加進(jìn)去了啊，可是Marker也降解了嗎？?jī)蓧K膠一塊跑的，另一塊沒(méi)事啊，奇了怪了

你的兩塊膠是同時(shí)制作的一模一樣的膠嗎？會(huì)不會(huì)是膠的問(wèn)題？

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6樓2011-10-27 15:45:14

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7樓2011-10-27 15:48:32

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再做一遍試試，做多了才能找出原因

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8樓2011-10-27 16:58:34

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congconglyr

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1樓: Originally posted by yeshui at 2011-10-27 10:32:38:
在跑瓊脂糖凝膠電泳的過(guò)程中，那個(gè)loadingbuffer越來(lái)越淺，是怎么回事��？之前上樣的時(shí)候很藍(lán)的，我做的是PCR篩選，然后把產(chǎn)物全加進(jìn)去了

可能是你的膠濃度太小了，或者電壓太大。不同儀器的設(shè)定是不一樣的，需要你去摸索��！

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9樓2011-10-27 17:14:26

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6樓: Originally posted by peace12039088 at 2011-10-27 15:45:14:
你的兩塊膠是同時(shí)制作的一模一樣的膠嗎？會(huì)不會(huì)是膠的問(wèn)題？

是啊，另一塊挺好的啊，同時(shí)制的膠倒的板啊

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10樓2011-10-27 17:26:03

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