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yuhai4444木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
【求助/交流】固氮菌的固氮能力測(cè)定一般是用什么方法�。� 已有14人參與
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| 最近試驗(yàn)遇到困難了，篩選出來(lái)的固氮菌，消煮后用凱式定氮儀測(cè)，卻沒(méi)有固氮力，不知道怎么辦，我看文獻(xiàn)上很多用的是乙炔還原法，很少用凱式定氮儀來(lái)側(cè)固氮菌的固氮能力，不知是方法不太好，還是本來(lái)篩出來(lái)的，就沒(méi)有固氮力，這一步?jīng)]有做好，接下來(lái)的工作都沒(méi)有辦法做了，郁悶中啊，請(qǐng)大家?guī)兔Ψ治龇治觥?img src="https://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/smile.gif" align="absmiddle" border="0"> |
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將菌先培養(yǎng)在血清小瓶中，在28～30℃下培養(yǎng)24h～48 h后，將血清小瓶蓋在無(wú)菌條件下?lián)Q成橡膠塞，用無(wú)菌注射器抽出10%的氣體，然后給每瓶注入2mLC2H2，再置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48 h。從各培養(yǎng)瓶中取氣樣10μL，注入氣相色譜儀(GC)中，測(cè)C2H2，C2H4的生成情況。從氣相色譜儀顯示屏的C2H4 峰值判斷有無(wú)C2H4的產(chǎn)生， 以接種但未注入C2H2的試管作為對(duì)照。按下列公式計(jì)算固氮酶活性： N=(hx×C×V)/(hs×常數(shù)×t) 式中，hx 為樣品峰值，hs 為標(biāo)準(zhǔn)C2H4 峰值，C 為標(biāo)準(zhǔn)C2H4 濃度(nmol•mlL−1)， V 為試管體積(mL)， 常數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)C2H4 在測(cè)試時(shí)的體積(mL)，t 為樣品培養(yǎng)時(shí)間(h)， N 為產(chǎn)生的C2H4 濃度[即固氮酶活性， nmol(C2H4)•h−1•mL−1]。 |
9樓2012-05-21 10:31:50
yunhua9681
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8樓2012-05-16 21:21:44
10樓2012-11-21 08:44:01
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